1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬鏈球菌2型病理學(xué)研究及其雙重?zé)晒釶CR檢測(cè)方法的建立姓名：王偉偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：鄧俊良;王志亮20070501S t u d a y o n p a t h o g e n i c i t y o f t h eS t r e p t O C O C C U S s u i ss e r o t y p e 2 a n d D u a l r e a l ．t i m eP C R

2、f o r d e t e d t i o n o fs t r e p t o c c o u s s u i ss e r o t y p e 2W a n g w e i w e i ( C l i n i c a lV e t e r i n a r yM e d i c i n eD i r e c t e db y D e n g J u n l i a n g a n d W a n g z h i l i a n gA

3、b s t r a c t T h r o u g h e l i m i n a t i n g t o x i c m a t e r i a l i n s w i n e , w e d i d t h e S y s t e mR e s e a r c h o np a t h e m a t o l o g yc h a n g ec a u s e db ys t r e p t o c c o u s s u i ss

4、 e r o t y p e 2 ．A n d s e tu pt h e a c c u l - a t ea n ds p e e d l y m e t h o do f t h e d u e lr e a l - t i m e P C R o n s t r e p t o c e o u s s u i ss e r o t y p e 2 d e t e c t i o n ．T h i se x p e r i m e

5、 n t u s e ds t r e p t o c c o u ss u i ss e r o t y p e 2p r e s e r v e di nN a t i o n a lD i a g n o s t i cC e n t e rf o r E x o t i cA n i m a lD i s e a s e t oe l i m i n a t et o x i cm a t e r i a li np i g l

6、 e t s ．w ec h o o s e d n i n e3 0d a y - a g eS P F p i g l e t s ，f r a e t i o n a t e dt h e mi nt h r e eg r o u p s ．W ee l i m i n a t e d t o x i cm a t e r i a li nt h ep i g l e t s b yi n t r a m u s c u l a

7、ri n j e c t i o n ，i n t r a v e n o u s i n j e c t i o n a n dP O ．W e r e s e a r c h e d p 址h o l o g yc a u s e db ys t r e p t o c c o u s s u i s s e r o t y p e 2 ，t h m u g l l c l i n i c a l o b s e r v a t i

8、 o n , c l i n i c a l o b s e r v a t i o n a n dt i s s u es e c t i o nd y e db yH E ．T h e r e s u l t ss h o w e dt h a tt h es t r e p t o c c o u ss u i sS e m t y p e 2h a da s t r o n gp a t h o p o i e s i s o

9、nh e a l t h yp i g l e t ．T h e g r o u po f I M w a s i n v a s i e da R e r1 2 h ，a n dd e a da f t e r1 6 h ，i t ’Sf a s t e rt h a nt h eg r o u po f I V , t h eg r o u p o f P Oa n d g r o u pC K h a d n om o r b i

10、 d i t y ．T h er e s u l t so fp r o s e e t i o ns h o w e dt h i s b a c t e d u mc o u l dc a u s ea f f e c t i o n i n m o s to r g a n s ．A f t e rr e s e a r c h o fp a t h o l o g y ，w e f o u n d t h ea l v e o

11、l a rw a l lW a sw i d e n b yd r o p s y ，i n f l a m m a t o r yc e l lg a t h e r e d ，b u l ko f F i b r i n t h r o m b u s i n b l o o dv e s s e l ；t h ed e g e n e r a t i o n o f p a r e n c h y m a lh e p a t i

12、 cc e l l s ，F(xiàn) i b r i nt h r o m b u si nt h es i n u sh e p a t i c a s ；g l o m c m l o s W a sb r o a d e n ，b l e e d ，n e c r o s i s ，n e p h r i ct u b u l ew a sn e c r o s i s ，t h e o t h e r o r g a n s h a d

13、 n o ts e r i o u sp a t h o l o g i c a lc h a n g e ．T h e o t h e r p u r p o s e o f t h i se x p e r i m e n t i s t os e t u p a m o r ea c c u r a t ea n d m o r e q u i c k l ym e t h o dt o d e t e c t t h es t

14、r e p t o e c o u ss u i s s e r o t y p e 2 ．b yd u a l r e a l - t i m e P C R w h i c hC a nd e t e c t t h et w om a r k e rg e n e so f C P S 2 Ja n dM R P ，W ed e s i g n e d s p e c i f i c i a l a m p l i f i c a

15、 t i o np r i m e ra n d t h e i rp r o b e s t o a i m d i r e c t l ya tc a p s u l a rb o l y s a c c h a r i d e s 、m u r a m i d a s ep r o t e i n ( C P S 2 J m a r k e rw i t hH E X , 腳m a r k e r w i t hR O X ) b

16、 y B E A C O N D e s i g e n e r 2 ．0 ．t h r o u g h t h eo p t i m i z a t i o no f e a c hp a r a m e t e r s ，t o s e tu p d u a l r e a l - t i m eP C R m e t h o dt o d e t e c t t h et w og e n e ss i m u l t a n e

17、 o u s l y ．C o m p a r e d t h i sm e t h o dw i t hc o m m o n P C R ，w e f o u n d t h i sm e t h o dh a s g o o d s p e c i f i c i t y ( t h e r ei sn o c o n s e n s u a lr e a c t i o nw i t ho t h e r s e r o l o