1、研究目的：
　　乳腺癌已成為全球女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，占女性新發(fā)癌癥的29％，是20-59歲女性最大的癌癥死因，嚴重地影響了女性的健康。紫草素（Shikonin）為中藥紫草的主要有效成分。體外實驗已證實，紫草素具有較強的抗乳腺癌作用。然而，紫草素難溶于水，且體內分布廣泛。有研究報道，小鼠靜脈注射3H標記的紫草素后，體內分布廣泛，含量從高到低依次為膽汁、肝＞肺、脾、腎、心、皮膚＞睪丸、肌肉、腦。為提高紫草素對乳腺癌組織的靶向性，

2、本研究合成了具有溫度敏感性的嵌段共聚物(BlockCopolymer Micelles，BCMs)，其能在水中自組裝成納米膠束，負載紫草素載。同時，在腫瘤微環(huán)境相對于正常組織較高溫度的條件下，增強溫敏納米膠束(ThermosensitiveNanomicelle，TN)的細胞內吞，實現溫敏被動靶向。最后，對負載紫草素的溫敏納米膠束(Shikonin-loaded Thermosensitive Nanomicelle，STN)的生物相容

3、性及體內外抗腫瘤作用進行評價。
　　研究方法：
　　本研究首先要合成具有溫度敏感性的PID118-b-PLA39，使其體積相轉變溫度(VolumePhase Transition Temperature，VPTT)控制在40℃左右，具有體內外溫敏被動靶向功能。通過在水中透析自組裝，調節(jié)PID118-b-PLA39在水中的結構形態(tài)，制備溫敏納米膠束。利用膠束PLA疏水內核紫草素的水溶性，進一步形成STN。接著，利用動態(tài)/靜態(tài)激

4、光光散射儀(Dynamic/Static Light Scattering Instrument，DLS)和透射電子顯微鏡（Transmission Electron Microscope，TEM）對所制備的溫敏納米膠束的性能和結構進行測定。在體外實驗中，首先通過測定溫敏納米膠束與BSA的結合后的粒徑分布，測定其血清穩(wěn)定性。其次，利用倒置熒光顯微鏡和LSCM觀察負載FITC的溫敏納米膠束(FITC-loaded Thermosensit

5、ive Nanomicelle，FTN)被乳腺癌MCF-7細胞內吞和富集的程度。通過CCK-8實驗評價溫敏納米膠束細胞毒性，以及負載紫草素后的細胞殺傷效果。用流式細胞儀檢測STN對乳腺癌MCF-7細胞的凋亡影響。在體內實驗中，通過構建乳腺癌荷瘤裸鼠模型，利用小動物活體成像儀評價FTN在荷瘤BALB/C裸鼠體內的分布。構建乳癌荷瘤小鼠，觀察尾靜脈注射STN后，裸鼠體重、腫瘤的大小及生存期的不同。設定組別為:PBS組（Control）、游離

6、紫草素組(Free Shikonin, FS)、STN組(37℃)、STN組(40℃)。
　　研究結果：
　　我們成功合成了具有溫度敏感性的溫敏納米膠束。體外穩(wěn)定性試驗表明，其在血清中的穩(wěn)定性良好。倒置熒光顯微鏡和LSCM結果表明，FTN在40℃的情況下被乳腺癌MCF-7細胞內吞并富集的程度明顯強于37℃組和游離紫草素組。CCK-8實驗表明，溫敏納米膠束生物毒性較低，但負載紫草素后則能有效殺傷乳腺癌MCF-7細胞，40℃組明

7、顯37℃組。流式細胞儀檢測結果表明，STN在40℃的情況下，能有效誘導乳腺癌MCF-7細胞的凋亡。體內分布結果發(fā)現，FTN在靜脈給藥進入裸鼠體內24 h后，可以從小鼠的實體瘤中觀察到非常明顯的FTN聚集。體內抑瘤實驗表明，STN治療后，乳腺癌實體瘤的生長得到明顯的抑制，其增長速度比對照組明顯減慢(PBS=3859 mm3，FS=2372 mm3, STN(37℃)=2278 mm3, STN(40℃)=1235 mm3; STN(40℃