大米肽酶解工藝的優(yōu)化及抗氧化肽的分離鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、我國是稻谷生產(chǎn)大國,年產(chǎn)稻谷1.8億噸以上,約占世界總產(chǎn)量的42%。米渣是制糖工業(yè)的副產(chǎn)品,蛋白含量高達(dá)60%(干基)以上,但目前尚未被合理利用。大米蛋白經(jīng)蛋白酶水解得到大米多肽,理化性質(zhì)和功能均有明顯改善,大米多肽作為一種新型的蛋白資源,不僅能抗氧化、降血壓,還能增強(qiáng)機(jī)體免疫力,因此可以用來研發(fā)高附加值的產(chǎn)品。本課題以制糖工業(yè)的副產(chǎn)物米渣(超微粉碎至400目)為原料,對酶解工藝進(jìn)行優(yōu)化,用粉末活性炭對酶解液進(jìn)行脫色,并對大米多肽抗氧化

2、組分進(jìn)行分離純化鑒定。主要研究結(jié)果如下:
  (1)酶解工藝的優(yōu)化:以大米渣為原料,選用蛋白酶K對其進(jìn)行酶解,確定最佳酶解工藝條件如下:料水比1∶7(g∶mL),酶添加量6000 U/g,酶解時(shí)間6h,溫度60℃,起始pH8.0,此條件下大米多肽的轉(zhuǎn)化率為39.67%,氨基酸轉(zhuǎn)化率為4.31%,酶解產(chǎn)物主要是3~8個(gè)氨基酸組成的多肽混合物。
  (2)粉末活性炭脫色:用粉末活性炭對大米蛋白酶解后的多肽液進(jìn)行脫色,以脫色率和多

3、肽損失率為評價(jià)指標(biāo),確定最佳脫色條件為:脫色溫度55℃,脫色pH為3.0,活性炭添加量0.5%,脫色時(shí)間3h。此時(shí)脫色率為76.14%,多肽損失率為3.32%。
  (3)放大及脫鹽實(shí)驗(yàn):放大實(shí)驗(yàn)中多肽轉(zhuǎn)化率高達(dá)42.24%,氨基酸轉(zhuǎn)化率為5.97%,說明以優(yōu)化的酶解工藝條件進(jìn)行放大生產(chǎn)具有可行性。用納濾方法脫鹽后,酸溶蛋白含量達(dá)到80.28%,灰分含量只有3.64%。
  (4)抗氧化肽的分離鑒定:對大米蛋白酶解液進(jìn)行生理

4、活性分析,發(fā)現(xiàn)其具有較強(qiáng)的抗氧化能力,尤其是分子量小于3 KDa的組分,當(dāng)濃度達(dá)到40 mg/mL時(shí),對DPPH自由基的清除率高達(dá)到96%。通過高效凝膠過濾、反相高效液相制備色譜和液質(zhì)聯(lián)用等方法對其進(jìn)行分離純化鑒定,最終得到抗氧化序列L-Q-P-Y(Leu-Gln-Pro-Tyr),相對分子質(zhì)量大小為519.27 Da??寡趸腖-Q-P-Y清除DPPH自由基的能力與還原性谷胱甘肽相差不大,當(dāng)濃度同為1 mg/mL時(shí),抗氧化肽L-Q-P

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