紫菜ACE抑制肽提取純化與結(jié)構(gòu)鑒定及飲料應(yīng)用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文通過優(yōu)化壇紫菜的珠磨、酶解工藝,確定了提取紫菜多肽的最佳工藝;采用鹽析、凝膠層析、反相柱層析得到了三種物質(zhì);通過解析核磁共振和質(zhì)譜數(shù)據(jù)確定了三種物質(zhì)的結(jié)構(gòu);通過優(yōu)化紫菜多肽原液的脫腥、殺菌工藝和配方,研制了一款紫菜多肽飲料,并對中試生產(chǎn)的成品飲料進(jìn)行感官檢驗(yàn)、理化檢驗(yàn)、微生物檢驗(yàn),檢驗(yàn)結(jié)果符合生產(chǎn)要求和國標(biāo)要求;最后通過急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)證明了紫菜ACE抑制肽原液和紫菜多肽飲料的安全性。
  通過測定蛋白質(zhì)含量和蛋白質(zhì)提取率來考

2、察料水比和珠磨時間對珠磨效果的影響,確定最佳珠磨工藝:料水比1:15,珠磨時間80 min;通過測定ACE抑制率來考察料水比、酶種類、復(fù)合酶組合種類及作用方式對酶解效果的影響,并進(jìn)行正交試驗(yàn)做最后的優(yōu)化,確定了最佳酶解工藝,二次酶解法:第一次酶解時,料水比為1:15,胰蛋白酶的酶解時間為2 h,添加量為2%,第二次酶解時,料水比為1:10,堿性蛋白酶的酶解時間為3 h,添加量為1%,酶解環(huán)境均為最適溫度和pH,此時酶解液的蛋白質(zhì)含量為1

3、.25%,蛋白質(zhì)提取率為85.22%,多肽原液ACE抑制率為93.5%。
  通過硫酸銨梯度鹽析將經(jīng)珠磨、酶解處理而得的紫菜ACE抑制肽原液分成7個組分,分別進(jìn)行Sephadex G15凝膠層析共得到26個組分,篩選高ACE抑制活性組分進(jìn)行成分對比分析,并對其采用RP-C18柱層析進(jìn)一步分離純化,得到5個單一組分,結(jié)合核磁共振和質(zhì)譜分析技術(shù)鑒定出了3種氨基酸的結(jié)構(gòu),即苯丙氨酸、異亮氨酸、亮氨酸。
  通過感官評價來考察β-環(huán)

4、糊精對紫菜ACE抑制肽原液脫腥效果的影響,確定最佳脫腥工藝:β-環(huán)糊精添加量為1.5%;通過感官評價和微生物檢驗(yàn)來考察紫菜ACE抑制肽原液的殺菌效果,確定最佳殺菌工藝:120℃恒溫3 min;經(jīng)殺菌處理后,紫菜ACE抑制肽原液仍有較好的ACE抑制作用,說明其ACE抑制作用具有較好的熱穩(wěn)定性;通過感官評價確定紫菜多肽飲料的配方,并對中試生產(chǎn)的成品進(jìn)行3項(xiàng)感官指標(biāo)、16項(xiàng)理化指標(biāo)、7項(xiàng)微生物指標(biāo)的檢驗(yàn),均符合生產(chǎn)要求和國標(biāo)要求;通過急性經(jīng)口

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