1、目的：本實(shí)驗(yàn)利用ElectroForce3200力學(xué)試驗(yàn)儀搭載的BioDynamic生物反應(yīng)艙系統(tǒng)對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞施加單軸向周期性牽張應(yīng)力，通過檢測PKCζ與p-PKCζ蛋白表達(dá)和細(xì)胞骨架蛋白的變化，觀察單軸向周期性牽張應(yīng)力對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞的影響，深入研究成骨細(xì)胞的力學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，為骨組織工程和臨床治療提供新的理論依據(jù)。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)將分離提取的SD大鼠成骨細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，將成骨細(xì)胞與彈性載體復(fù)合，通過

2、利用ElectroForce3200力學(xué)試驗(yàn)儀搭載的BioDynamic生物反應(yīng)艙系統(tǒng)為體外培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞加載0％、1％、2％、3％、4％、5％的單軸向周期性牽張應(yīng)力應(yīng)變3小時(shí)。使用免疫印跡法(Western Blotting)和免疫熒光(Immunofluorescent)染色檢測成骨細(xì)胞PKCζ與p-PKCζ蛋白表達(dá)和F-actin細(xì)胞骨架蛋白的變化，并使用激光共聚焦顯微鏡觀察并量化細(xì)胞骨架蛋白的變化。
　　 結(jié)果：對(duì)實(shí)

3、驗(yàn)各組細(xì)胞施加牽張應(yīng)力分別為形變幅度0％、1％、2％、3％、4％、5％，加載3小時(shí)，與對(duì)照組、抑制劑組相比牽張應(yīng)力可以顯著上調(diào)大鼠成骨細(xì)胞PKCζ蛋白的表達(dá)，其中在2％形變加載時(shí)對(duì)比前組細(xì)胞在受力后PKCζ蛋白的表達(dá)上調(diào)明顯。免疫熒光結(jié)果顯示，在短時(shí)間單軸向周期性牽張應(yīng)力加載后，細(xì)胞骨架感知應(yīng)力，出現(xiàn)重構(gòu)現(xiàn)象。激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞骨架示向周邊散開并重構(gòu)。
　　 結(jié)論：成骨細(xì)胞對(duì)機(jī)械牽張應(yīng)力的反應(yīng)是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，牽張應(yīng)力