1、近年來,隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,能源危機(jī)越來越嚴(yán)重,開發(fā)可再生能源已經(jīng)成為必然。生物柴油可再生、安全無毒、燃燒性能好,可以作為石化燃料的替代品。目前,制備生物柴油多以動植物油脂為原料,但由于微生物油脂的脂肪酸成分同動植物油脂相似,且具有許多優(yōu)點(diǎn),越來越多的研究者嘗試?yán)梦⑸镉椭苽渖锊裼?。有些微生物可以在體內(nèi)積累單細(xì)胞油脂,被稱作產(chǎn)油微生物,酵母菌因其生長速度快、油脂含量高,受到廣泛的關(guān)注。
　　本研究從紅樹林樣品中分離得到100

2、株海洋酵母菌,從中篩選出一株高產(chǎn)油脂酵母菌 P10菌株。從形態(tài)學(xué)觀察、生理生化實(shí)驗(yàn)和分子生物學(xué)3方面對 P10菌株進(jìn)行鑒定,確定 P10菌株屬于普魯蘭短梗霉產(chǎn)黑色素變種(Aureobasidium pullulans var. melanogenum)。利用單因子實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化P10菌株產(chǎn)油培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件,確定了P10菌株的產(chǎn)油最佳培養(yǎng)基成分(w/v):8.0％葡萄糖,C/N比600[0.02%酵母粉,0.02%(NH4)2SO4],

3、0.15%MgSO4·7H2O,0.7%KH2PO4,0.25%Na2HPO4,0.015%CaCl2,0.015%FeCl3·6H2O,0.002%ZnSO4·7H2O,0.002%MnSO4·H2O,初始pH值為6.0。按7.5%(v/v)的接種量(種子液OD600nm=30),在28.0℃和180 rpm條件下振蕩培養(yǎng)。用10-l發(fā)酵罐發(fā)酵P10菌株,120h后,油脂含量高達(dá)66.3%(w/w),菌體生長量為12.8 g/l,油脂

4、得率是0.11g/g,菌體得率是0.16 g/g,生產(chǎn)強(qiáng)度是0.0009g/g/h。
　　用氣相色譜分析儀對 P10菌株所產(chǎn)油脂進(jìn)行脂肪酸成分分析,發(fā)現(xiàn)棕櫚酸(C16:0)(26.7%)、棕櫚油酸(C16:1)(1.7%)、硬脂酸(C18:0)(6.1%)、油酸(C18:1)(44.5%)和亞油酸(C18:2)(21.0%)是油脂的主要成分,其中棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:2)和油酸(C18:1)占到脂肪酸總量的90%多