1、DNA容易受到來(lái)自細(xì)胞內(nèi)外的刺激而造成各種損傷，這些損傷會(huì)通過(guò)增加基因突變的概率、加劇DNA錯(cuò)誤復(fù)制而威脅基因完整性。T4多核苷酸激酶(PNK)和人類(lèi)8-oxoG DNA糖基化酶1(hOGG1)能夠分別通過(guò)修復(fù)DNA5'-羥基末端和基于堿基切除修復(fù)(BER)過(guò)程修復(fù)DNA損傷來(lái)維護(hù)基因的完整性。核酸分子探針熒光傳感器由于其設(shè)計(jì)簡(jiǎn)便、實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、選擇性好，近年來(lái)也獲得了快速持久的發(fā)展。本論文通過(guò)巧妙設(shè)計(jì)熒光分子探針構(gòu)筑了簡(jiǎn)便、

2、新奇的DNA生物傳感器實(shí)現(xiàn)對(duì)酶的研究。
　　本論文分三個(gè)部分:
　　1、基于有效的酶反應(yīng)即PNK催化的發(fā)卡探針(HP)的磷酸化和λexo的裂解反應(yīng)，使得觸發(fā)DNA片段(tDNA)從HP上釋放，進(jìn)而能夠催化雙分子信標(biāo)(bi-MBs)的組裝，導(dǎo)致熒光信號(hào)的放大，實(shí)現(xiàn)PNK活性的靈敏檢測(cè)。PNK的檢測(cè)限為1mU mL-1，優(yōu)于或相當(dāng)于已報(bào)道的檢測(cè)方法。而且，這種方便靈敏的方法同樣能夠從常見(jiàn)的幾種抑制劑中篩選抑制劑的活性。對(duì)于多核苷

3、酸激酶活性的靈敏檢測(cè)和抑制劑的篩選，提供了一個(gè)有前景的平臺(tái)，也在生物過(guò)程研究、藥物釋放和臨床診斷中顯示出巨大的潛力。
　　2、結(jié)合外切酶反應(yīng)和切口酶輔助的熒光信號(hào)放大，構(gòu)筑了一個(gè)新型的傳感平臺(tái)用于靈敏檢測(cè)T4多核苷酸激酶的活性和抑制作用。通過(guò)循環(huán)切割DNA熒光探針信號(hào)放大，實(shí)現(xiàn)靈敏檢測(cè)PNK活性，檢測(cè)限為0.05mU mL-1。本方法實(shí)現(xiàn)在均相溶液中采用簡(jiǎn)單、無(wú)分離方法檢測(cè)。此外，也成功分析了幾種已知激酶抑制劑對(duì)PNK的抑制作用。

4、
　　3、基于ExoⅢ輔助自發(fā)信號(hào)擴(kuò)增技術(shù)實(shí)現(xiàn)了熒光法檢測(cè)hOGG1活性。本方法巧妙設(shè)計(jì)了兩個(gè)發(fā)卡探針（HP1和HP2），當(dāng)加入hOGG1時(shí)，HP1在8-oxo-7，8-dihydroguanine(8-oxoG)位點(diǎn)被hOGG1識(shí)別切斷，隨后ExoⅢ將HP莖一條鏈水解，釋放觸發(fā)DNA片段(tDNA1)。tDNA1與HP2部分雜交，HP2的3'-末端形成雙鏈引發(fā)ExoⅢ輔助的循環(huán)裂解并釋放出另一端觸發(fā)DNA片段(tDNA2)，tD