埃博霉素柱層析純化工藝研究.pdf_第1頁(yè)
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1、埃博霉素是一類(lèi)由纖維堆囊菌代謝產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物,并展現(xiàn)出了良好的抗腫瘤細(xì)胞活性。其作用機(jī)理與傳統(tǒng)抗癌藥物紫杉醇相似,因而在抗腫瘤藥物的研發(fā)領(lǐng)域具有廣闊的發(fā)展前景。埃博霉素的純化是制約其走向市場(chǎng)的瓶頸之一。本論文針對(duì)高純度埃博霉素的制備,采用3種技術(shù)手段對(duì)埃博霉素的分離進(jìn)行了工藝研究。
  凝膠柱層析是一種分子篩過(guò)濾層析技術(shù)。本實(shí)驗(yàn)以埃博霉素粗提物為原料,研究了交聯(lián)葡聚糖凝膠LH-20分離純化埃博霉素的工藝,考察了多種工

2、藝因素對(duì)埃博霉素分離純化效果的影響。通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到最佳分離條件為:洗脫劑一次洗脫為丙酮,二次洗脫為甲醇,流速為0.2 mL/min,進(jìn)樣量埃博霉素A為1.0 mg。在此條件下,得到埃博霉素A和B的純度分別為90.27%和77.34%。
  離子交換層析通過(guò)目標(biāo)物和樹(shù)脂基團(tuán)之間電荷的相互作用實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離。本實(shí)驗(yàn)同樣以埃博霉素粗提物為原料,研究了離子交換樹(shù)脂分離純化埃博霉素的工藝,考察了多種工藝因素對(duì)埃博霉素分離純化效果的影響。確定最

3、佳分離條件為:選用D301弱堿陰離子交換樹(shù)脂,樣品溶液pH為5,吸附流速為1.5 mL/min,洗脫劑為80%乙醇,洗脫流速為1.0 mL/min。在此條件下,埃博霉素的純度由不足10%提高至58.7%。埃博霉素的等溫吸附規(guī)律可用Langmiur方程表示,吸附動(dòng)力學(xué)規(guī)律可用Lagergren準(zhǔn)一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程表示,表明D301樹(shù)脂對(duì)埃博霉素的吸附特點(diǎn)是單分子層表面吸附。
  分子印跡技術(shù)通過(guò)印跡聚合物的選擇性識(shí)別實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離。本實(shí)

4、驗(yàn)首先研究了埃博霉素的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物紅霉素的印跡工藝。采用沉淀聚合法,優(yōu)化后的工藝為:以n(紅霉素):n(MAA):n(EGDMA)=1:4:15,乙酸乙酯為致孔劑。單位吸附量達(dá)到52.6 mg/g。通過(guò)掃描電鏡和紅外譜圖對(duì)聚合物進(jìn)行表征。印跡聚合物的等溫吸附規(guī)律可用Freundlich方程表示,吸附動(dòng)力學(xué)規(guī)律可用Lagergren準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)方程表示,表明該印跡聚合物對(duì)紅霉素的吸附特點(diǎn)為多層吸附。然后通過(guò)CNST固體發(fā)酵,四氯化碳萃取和制

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