粗壯脈紋孢菌發(fā)酵豆渣生產(chǎn)低聚糖的研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本文以豆制品加工副產(chǎn)物——豆渣為原料,利用本實(shí)驗(yàn)室從江西傳統(tǒng)發(fā)酵食品中篩選分離得到的具有高產(chǎn)纖維素酶和β-胡蘿卜素能力的菌株——粗壯脈紋孢菌(Neurospora crassa)對(duì)其進(jìn)行發(fā)酵,分析探討發(fā)酵過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分的變化規(guī)律。并以發(fā)酵后豆渣中的低聚糖為對(duì)象,研究了發(fā)酵豆渣中低聚糖的最佳提取工藝條件、低聚糖的分離純化工藝及低聚糖的組成;并利用體外發(fā)酵技術(shù)評(píng)價(jià)了發(fā)酵豆渣中低聚糖的功能性,以便為低聚糖的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)支持。得到的主

2、要結(jié)果如下:
   1、Neurospora crassa發(fā)酵豆渣過(guò)程中,隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng),豆渣培養(yǎng)基的回收率逐漸下降,至48 h之后趨于穩(wěn)定;粗纖維降解率和粗蛋白質(zhì)含量呈上升趨勢(shì),且在發(fā)酵40-48 h之后保持恒定;粗脂肪和類(lèi)胡蘿卜素含量則先呈上升趨勢(shì),增加至峰值后又逐漸下降,但粗脂肪在下降到一定程度后趨于穩(wěn)定;可溶性總糖含量隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)而上升,至峰值時(shí)又緩慢下降,之后又回升并在48 h后趨于穩(wěn)定。
   2、

3、經(jīng)過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化發(fā)酵豆渣中低聚糖的提取工藝,得到最優(yōu)提取工藝條件為:料液比1∶25,提取時(shí)間為90 min,提取溫度為70℃,乙醇濃度為50%,提取2次。在此最優(yōu)提取工藝條件下,發(fā)酵豆渣中低聚糖得率為11.91%。
   3、采用Sevag法除蛋白,AB-8大孔樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附脫色,對(duì)低聚糖粗提液進(jìn)行純化處理。結(jié)果表明:蛋白質(zhì)去除率達(dá)67.21%,脫色率62.41%,低聚糖保留率分別為95.98%和91.22%,這兩種方

4、法能夠很好的純化低聚糖。純化后的低聚糖經(jīng)高效液相色譜技術(shù)分離,得到2個(gè)分離組分(組分A和組分B);通過(guò)HPLC-ESI-MS和紅外吸收光譜等技術(shù)的進(jìn)一步分析,組分B具有m/z341去質(zhì)子準(zhǔn)分子離子峰,這是一個(gè)二糖分子去掉一個(gè)質(zhì)子得到的;紅外吸收光譜分析其具有糖類(lèi)化合物的特征吸收峰,其中874.6 cm-1是吡喃型β-型C-H變角振動(dòng)的特征吸收峰,因此可以確定組分B為纖維二糖。
   4、將分離純化后的低聚糖樣品進(jìn)行體外發(fā)酵實(shí)驗(yàn),

5、研究其體外發(fā)酵特性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):800 mg/L低聚糖組具有良好的發(fā)酵特性,產(chǎn)氣量(7.25±0.16 mL)顯著低于對(duì)照組(7.98±0.42 mL)(P<0.05),顯著高于葡萄糖組(6.49±0.44 mL)(P<0.05);部分低聚糖組發(fā)酵液pH(4.95-5.00)顯著低于對(duì)照組(5.03±0.03)(P<0.05),800 mg/L低聚糖組最低pH為4.95;隨著低聚糖質(zhì)量濃度的增加,發(fā)酵液NH3-N含量呈下降趨勢(shì),且在1g/

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