1、全氟辛烷磺酸鹽(PFOS)和全氟辛烷磺酸(PFOA)是全氟污染物(PFcs)中的代表,具有疏水防塵作用,自上世紀50年代,在汽車涂料、紡織、不粘鍋涂層等產(chǎn)品中廣泛使用。全氟化合物毒性被逐漸發(fā)現(xiàn),PFOS和PFOA也被禁用,但它們的毒性作用機制仍未明確。東亞三角渦蟲(Dugesia japonica)為原始三胚層動物,具有強大的再生能力,對環(huán)境刺激非常敏感,可用于檢測水體質(zhì)量。本論文以PFOS和PFOA處理渦蟲,探究壓力相關(guān)蛋白的基因表達

2、量與藥品處理濃度及時長的關(guān)系,并對渦蟲經(jīng)藥物處理后細胞核DNA損傷情況進行初步檢測。
　　實驗以6個濃度的PFOS和PFOA溶液分別處理完整渦蟲和再生渦蟲,選擇的壓力相關(guān)蛋白基因功能涉及細胞抗逆性,神經(jīng)發(fā)育,凋亡,信號轉(zhuǎn)導等,采用RT-PCR技術(shù)檢測它們mRNA表達量的相對變化。結(jié)果表明,低濃度PFOS和PFOA短時間處理渦蟲,hsp70和hsp90 mRNA表達量受到抑制,隨著處理時間的延長,表達量上升,可能為毒性壓力下產(chǎn)生應激

3、反應;在高濃度長時間處理組,渦蟲p53基因表達量上升,渦蟲無法承受藥物毒性進入凋亡階段;另外,兩種藥物對神經(jīng)相關(guān)基因 Xnp影響不大,wnt信號表達量受PFOA誘導顯著增加,卻不受PFOS影響。
　　以5個濃度的PFOS和PFOA處理完整渦蟲和再生渦蟲,Western Blot技術(shù)探究HSP70蛋白的表達變化,結(jié)果顯示,各濃度PFOS和PFOA溶液處理完整渦蟲不同時長,都不能使HSP70蛋白表達量顯著改變,但再生渦蟲HSP70蛋白

4、受藥物誘導表達量可顯著增加,此結(jié)果與hsp70 mRNA變化趨勢不一致,可能是藥物對翻譯過程有抑制作用,隨藥物量的增加,蛋白高表達抵御毒性傷害,與是否處于再生狀態(tài)有關(guān)。
　　PFOS和PFOA溶液處理渦蟲1 d、4 d、7 d、10 d時,以單細胞凝膠電泳實驗檢測其部分細胞核DNA損傷情況,以探究這兩種藥物對細胞核DNA的毒性作用。結(jié)果顯示,PFOS不能造成渦蟲核DNA損傷,PFOA造成20％左右的受測細胞DNA損傷,與處理時長無