1、葡萄糖耐量因子(Glucose Tolerance Factor，GTF)是由三價(jià)鉻、半胱氨酸、天門冬氨酸、甘氨酸和谷氨酸組成的鉻復(fù)合物，具有協(xié)同胰島素促進(jìn)葡萄糖代謝的生物活性。本研究以富鉻能力強(qiáng)、遺傳性能穩(wěn)定、綜合指標(biāo)高的耐鉻性 GTF高產(chǎn)釀酒酵母菌株YSI-3.7為出發(fā)菌株，通過(guò)發(fā)酵罐培養(yǎng)，提取GTF，研究其對(duì)胰島素抵抗型脂肪細(xì)胞葡萄糖代謝的影響。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　在搖瓶發(fā)酵工藝的基礎(chǔ)上，通過(guò)15L和50L逐級(jí)放大實(shí)驗(yàn)，

2、對(duì)篩選菌株富鉻能力進(jìn)行研究。結(jié)果表明，通過(guò)50L發(fā)酵罐發(fā)酵工藝，菌株YSI-3.7有機(jī)鉻含量為1234μg/g，總鉻含量為1502μg/g，有機(jī)鉻占總鉻百分含量為82％，干菌體生物量為0.96g/100mL發(fā)酵液，濕菌體生物量為6.00g/100mL發(fā)酵液。菌株在發(fā)酵過(guò)程中保持較好的富鉻性能和較高的生物量，其富鉻能力是市售富鉻酵母產(chǎn)品的2-5倍，該菌種綜合生產(chǎn)性能良好。
　　利用氨水提取高鉻酵母菌粉中有機(jī)鉻，聯(lián)用SuperdexT

3、M75和Sephadex G25凝膠過(guò)濾層析對(duì)提取物進(jìn)行純化，得到五個(gè) A254峰，其中第二個(gè) A254峰與鉻峰吻合，收集鉻峰，利用反相高效液相（RP-HPLC）進(jìn)一步對(duì)鉻峰進(jìn)行分離，得到三個(gè) A254峰，其中第一個(gè) A254峰和鉻峰重合，收集鉻峰，繼續(xù)上反相高效液相色譜柱，出現(xiàn)一個(gè) A254峰，鉻峰與之重合且對(duì)稱分布，表明經(jīng)過(guò)多步柱層析純化后，得到GT F純化品。
　　以3T3-L1脂肪細(xì)胞為研究對(duì)象，通過(guò)10-7mmol/L胰

4、島素誘導(dǎo)處理48h使3T3-L1脂肪細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗。用純化的GTF及其他來(lái)源鉻作用抵抗型細(xì)胞（GTF添加量以鉻計(jì)），觀察其對(duì)細(xì)胞葡萄糖代謝的影響，結(jié)果顯示當(dāng)GTF與胰島素共同作用細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞葡萄糖消耗量呈劑量依賴效應(yīng)，當(dāng)鉻濃度為1μg/mL時(shí)，羅格列酮、GTF、吡啶酸鉻和三氯化鉻分別可使細(xì)胞葡萄糖消耗量提高3.1倍、2.5倍、1.7倍和1.2倍，表明GTF具有顯著調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的活性，同等劑量條件下，GTF作用效果高于其他來(lái)源鉻。<