1、近年國內(nèi)外對白地霉的研究投入越來越多，白地霉脂肪酶作為未來極具潛力的生物催化劑其在芳香化合物的合成、環(huán)境治理、飼料蛋白、生物柴油、生物傳感器食品加工及制藥行業(yè)等方面都有著巨大的潛能及開發(fā)價值。特別是在合成環(huán)十五內(nèi)酯方面，由于目前使用的化學(xué)合成法存在工藝復(fù)雜、對設(shè)備要求高、污染環(huán)境、所得率低等問題，而用脂肪酶催化合成環(huán)十五內(nèi)酯具有化學(xué)合成法無法比擬的優(yōu)勢，越來越多的人把目光轉(zhuǎn)向于生物合成法。因此白地霉脂肪酶具有很大研究價值和商業(yè)價值。

2、r>　　 本文從本實(shí)驗(yàn)室篩選出的脂肪酶高產(chǎn)菌株白地霉GXU08為出發(fā)菌株，提取了白地霉總DNA，克隆得到白地霉GXU08脂肪Ⅱ基因，分別構(gòu)建了不同的大腸桿菌表達(dá)載體，并實(shí)現(xiàn)了白地霉基因在pET32a(+)中的表達(dá)。將不同的表達(dá)載體分別導(dǎo)入DH5α、BL21(DE3)及Rosetta，只有當(dāng)載體選用pET32a(+)宿主菌選用Rosetta時，能成功表達(dá)，并在破胞后的上清中檢測出酶活，用對硝基苯酚棕櫚酸酯法測得酶活為17.8U/mL，S

3、DS-PAGE檢測到66kD的目的蛋白和預(yù)測的大小基本一致。利用金屬鎳親和層析對表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行純化。
　　 GeotrichumcandidumlipaseⅡ最適溫度為40℃，Tm值為45℃在50℃的高溫仍有適當(dāng)酶活。最適pH為9，在抗金屬離子方面K+、Ca2+離子對酶有一定的促進(jìn)作用(103％-112％)，Zn2+、Mg2+無明顯抑制作用(98％-96％)，Cu2+、Mn2+、Fe3+、Ni+有一定抑制作用(46％-88％)。H

4、g2+、Al3+明顯抑制作用(1.4％-10％)。
　　 用純酶冷凍干燥后制得的酶粉，進(jìn)行合成環(huán)十五內(nèi)酯的反應(yīng)，氣相色譜測得有目的產(chǎn)物生成，但含量較低。白地霉脂肪酶作為真菌脂肪酶在國內(nèi)仍處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，因此本實(shí)驗(yàn)為Geotrichumcandidum脂肪酶的商品化生產(chǎn)貢獻(xiàn)一份力量。此外，該脂肪酶基因在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)成功表達(dá)，為白地霉的研究增添新內(nèi)容，也為白地霉脂肪酶以后的研究及脂肪酶的工業(yè)化生產(chǎn)和生物法合成環(huán)十五內(nèi)酯奠定了一