1、隨著基因工程與分子生物技術(shù)的快速發(fā)展，轉(zhuǎn)基因生物的研發(fā)和商業(yè)化日益增多。與此同時(shí)，公眾對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性仍存憂慮。因此，轉(zhuǎn)基因生物的產(chǎn)業(yè)化過(guò)程中，轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)作為其中重要的技術(shù)支撐，對(duì)于轉(zhuǎn)基因生物的監(jiān)管尤為重要。同時(shí)，轉(zhuǎn)基因生物中的插入基因和基因修飾越來(lái)越復(fù)雜和多樣化，商業(yè)化的轉(zhuǎn)基因作物數(shù)量也呈現(xiàn)出逐年遞增的趨勢(shì)，轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)方法逐漸向?qū)︶槍?duì)多靶標(biāo)進(jìn)行的快速、精準(zhǔn)、高通量的核酸檢測(cè)分析技術(shù)方向發(fā)展。
　　聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（P

2、CR）技術(shù)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)已成為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品常規(guī)的定性、定量檢測(cè)方法，但這些技術(shù)都需要對(duì)溫度循環(huán)高精度控制的專業(yè)儀器，并且檢測(cè)時(shí)間都比較長(zhǎng)，這樣就極大限制了這些方法在快速檢測(cè)、田間實(shí)驗(yàn)的推廣應(yīng)用。與此同時(shí)，核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)得到了不斷發(fā)展與更新，其中，環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）是一種不需要精密儀器和繁瑣操作步驟的等溫?cái)U(kuò)增方法，此技術(shù)具有高特異性，高靈敏

3、度以及快速的特點(diǎn)，也因此在轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)方面得到了廣泛關(guān)注。
　　本研究側(cè)重轉(zhuǎn)基因成分快速篩選，根據(jù)八個(gè)常見(jiàn)轉(zhuǎn)基因元件（CaMV35S啟動(dòng)子，F(xiàn)MV35S啟動(dòng)子，bar，cry1Ac，CP4 epsps，pat，NptII和NOS終止子）的序列信息，設(shè)計(jì)特異性環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增引物，優(yōu)化LAMP反應(yīng)體系，并通過(guò)在環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物中加入SYBR Green I（1000×）熒光染料，建立了可視化的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增轉(zhuǎn)基因篩選體系。

4、r>　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明建立的八種轉(zhuǎn)基因元件特異性環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法具有高特異性，并且靈敏度（檢測(cè)限LOD）全部達(dá)到10個(gè)拷貝的基因組DNA，與傳統(tǒng)定性PCR的檢測(cè)限相比，從整體上有了一定幅度的提高[81]，并且整個(gè)檢測(cè)過(guò)程所需要的時(shí)間僅為一個(gè)小時(shí)，通過(guò)肉眼觀察顏色的變化即可立即判斷出檢測(cè)結(jié)果，不再需要擴(kuò)增后的電泳檢測(cè)。此外，對(duì)于來(lái)自上海出入境檢驗(yàn)檢疫局的實(shí)際樣品，我們利用LAMP檢測(cè)的結(jié)果也與理論結(jié)果完全一致。所以環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)為