1、維生素C第二步發(fā)酵是將L-山梨糖氧化生成2-酮基-L-古龍酸,由一組混菌配合進行,普通酮古龍酸菌(俗稱小菌)直接負責山梨糖生物氧化；另一種微生物俗稱大菌,包括巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)等,作為伴生菌起到輔助酮古龍酸桿菌生長和產(chǎn)酸的作用。
　　 為闡明大小菌相互作用關系從而提供發(fā)酵工藝優(yōu)化的依據(jù),本實驗運用GC-TOF-MS,對單獨接種的大小菌及不同比例、不同接種密度下的混菌發(fā)酵過程進行代謝組學的研究,

2、比較各種狀態(tài)下獲得的代謝組并進行相關分析,以對兩菌間相互作用機制進行闡述。主要研究結果為:(1)分別測定了大小菌單獨發(fā)酵時的代謝物種類和含量,推測出兩菌各自可能存在的代謝途徑；(2)對于混菌培養(yǎng)開發(fā)了熒光定量PCR方法測定細胞數(shù),獲得了混菌發(fā)酵時各自生長曲線及相圖。發(fā)現(xiàn)在巨大芽孢桿菌接種量為106CFU／ml時,隨酮古龍酸桿菌接種量的增加,巨大芽孢桿菌生長速度加快,最終的菌數(shù)狀態(tài)主要取決于初期的酮古龍酸桿菌接種量而非巨大芽孢桿菌接種量；

3、(3)測定了不同比例、不同接種密度混菌胞內代謝物種類和含量變化,并根據(jù)氨基酸和酮酸類物質的變化分析得到兩菌間存在氨分子的異化和轉移過程,根據(jù)核苷酸類物質的變化分析得到混菌中存在核苷酸降解過程；(4)通過測定不同比例、不同接種密度胞外代謝產(chǎn)物積累情況,發(fā)現(xiàn)隨著酮古龍酸桿菌接種量增加,胞外赤糖酸和2-酮-L-古龍酸積累量增加。此外,分析胞外積累半胱氨酸的趨勢可推測認為酮古龍酸桿菌的產(chǎn)酸作用可能與環(huán)境中的氧化還原狀態(tài)有關。
　　 這些