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文檔簡(jiǎn)介
1、微藻繁殖速度快,環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng),擁有很高的光合速率,并且可以合成許多具有獨(dú)特生理功能的生物活性物質(zhì),如微藻多糖、色素、蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸(PUFA)等,使其在醫(yī)藥用品和保健品領(lǐng)域的應(yīng)用具有廣闊的市場(chǎng)前景。但是,長(zhǎng)期以來(lái),人們僅注意到了微藻的直接使用價(jià)值,將其作為魚(yú)、蝦和貝類等海產(chǎn)品的直接餌料,或者飼料的添加劑,在最近的幾十年,人們才逐漸開(kāi)始關(guān)注微藻的綜合利用,開(kāi)始注重微藻生物活性物質(zhì)的研究與開(kāi)發(fā)。
本文從內(nèi)蒙古包頭附近水域及天
2、津塘沽港海域水體及沙土中分離篩選出四株微藻,并對(duì)其進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定以及生長(zhǎng)條件的優(yōu)化,并對(duì)不同微藻中色素和多糖的提取條件進(jìn)行了研究,使得微藻色素和多糖的得率大幅提高,微藻的生產(chǎn)成本進(jìn)一步降低,為微藻的綜合利用提供切實(shí)的理論依據(jù)和有利的技術(shù)支持,研究的主要內(nèi)容及結(jié)果如下:
1、成功篩得四株優(yōu)勢(shì)藻株XJ004、XJ006、XJ012和XJ014。通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察,XJ004為單細(xì)胞球形藻,當(dāng)其受到某一條件脅迫時(shí),藻細(xì)
3、胞逐漸由綠色變?yōu)榧t色;XJ006藻株細(xì)胞扁平,為墨綠色,呈梭形,多為穩(wěn)定的群體生活;XJ012、XJ014細(xì)胞均為綠色球形,無(wú)鞭毛,均以單細(xì)胞形式存在。利用18S rDNA在進(jìn)化上的保守性,分別對(duì)XJ004、XJ006、XJ012和XJ014藻株進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,確定XJ004為小球藻屬,Chlorella sp. XJ004;XJ006為柵藻屬,Scenedesmus sp. XJ006;XJ012為綠球藻屬,Chlorococcu
4、m sp. XJ012;XJ014為微擬球藻,Nannochloropsis sp. XJ014;對(duì)XJ006藻株藻種保存方法進(jìn)行了比較,保種時(shí)間最長(zhǎng)可達(dá)1年。
2、采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),對(duì)從沙地中分離的XJ006藻株生長(zhǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化,得出NaNO3的質(zhì)量濃度為2.0 g/L,MgSO4·7H2O的質(zhì)量濃度為0.1 g/L,K2HPO4·3H2O的質(zhì)量濃度為0.026 g/L時(shí),XJ006藻株的生物量最大,對(duì)數(shù)期末期的OD680
5、可達(dá)2.024。此外,針對(duì)XJ006藻株葉綠素的提取條件進(jìn)行了研究,得出干燥藻粉經(jīng)人工研磨5 min后,以95%乙醇溶液為浸提劑,40℃浸提5h,液料比70:1,浸提3次后葉綠素得率最高,可達(dá)5.403%。
3、對(duì)鹽藻ASP2基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的N、P、Mg三種元素進(jìn)行了優(yōu)化,得出NaNO3的質(zhì)量濃度為0.15 g/L,MgSO4·7H2O的質(zhì)量濃度為5 g/L,K2HPO4·3H2O的質(zhì)量濃度為0.025 g/L時(shí),該株鹽藻的生物
6、量最大,對(duì)數(shù)期末期的OD680可達(dá)0.531。通過(guò)對(duì)不同溶劑浸提β-胡蘿卜素得率的比較,得出鹽藻中β-胡蘿卜素提取的最佳溶劑為丙酮,得率可達(dá)0.76%。
4、對(duì)XJ004藻株的生長(zhǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化,得出NaNO3的質(zhì)量濃度為0.05 g/L, K2HPO4·3H2O的質(zhì)量濃度為0.1 g/L,MgSO4·7H2O的質(zhì)量濃度為0.05 g/L時(shí),XJ004藻株的生物量最大,對(duì)數(shù)期末期的OD680可達(dá)1.931。針對(duì)XJ004藻株蝦
7、青素含量的積累分別進(jìn)行缺氮誘導(dǎo)、高鹽誘導(dǎo)和強(qiáng)光照誘導(dǎo)培養(yǎng),得出缺氮誘導(dǎo)處理對(duì)蝦青素的積累的效果最為明顯,經(jīng)誘導(dǎo)過(guò)后的蝦青素得率可達(dá)0.967 mg/g。
5、在堿醇法提取微藻多糖的基礎(chǔ)上,研究了NaOH濃度、提取溫度和提取時(shí)間對(duì)XJ006藻株多糖提取率的影響,并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,得出多糖提取的最佳NaOH濃度、提取溫度和提取時(shí)間分別為0.2 mol/L,80℃,180 min。在此條件下,XJ006藻株多糖的得率可達(dá)到13.
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