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文檔簡介
1、菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)原產于中國,是一種藥食同源的中藥。其化學成分主要有萜類、黃酮類和多糖類等化合物,其中菊花粗多糖具有明顯的免疫調節(jié)等活性,但進一步有關其分離純化及生物活性的深入研究迄今鮮有報道。
本課題設計優(yōu)化菊花多糖的提取工藝,并對分離純化得到的均一多糖進行相應的化學結構與生物活性研究,旨在為開發(fā)治療腫瘤的候選藥物奠定科學基礎。
以杭菊花、懷菊花和亳菊花為原料,通
2、過正交實驗優(yōu)化水提醇沉法提取菊花多糖的工藝,結果三種菊花中的多糖類化合物均以提取次數(shù)和提取時間對其得率影響最大。再經離子交換樹脂和凝膠過濾柱層析分離純化,得到6種中性均一多糖和3種酸性均一多糖。應用高效凝膠滲透色譜(HPGPC)、紅外光譜(IR)及氣相色譜(GC)等技術方法對均一多糖的一級結構特征進行初步分析,結果所得9種均一多糖CMTA0S1、CMTA0S3、CMTA1aS1、CMJA0S1、CMJA0S2、CMJA2S2、CMBA0
3、S1、CMBA0S3和CMBA1aS1的重均分子量依次為7.52×104、7.80×103、6.12×104、7.80×104、1.04×104、3.61×104、5.79×104、1.35×104和5.19×104。9種多糖中均含有阿拉伯糖和半乳糖,其中6種中性均一多糖CMTA0S1、CMTA0S3、CMJA0S1、CMJA0S2、CMBA0S1和CMBA0S3主要由半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖組成,且以末端-、1,5-呋喃阿拉伯糖,1,
4、4-、1,3,6-吡喃半乳糖和1,4-吡喃葡萄糖5種連接方式為主;3種酸性均一多糖CMTA1aS1、CMJA2S2和CMBA1aS1由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸組成。
通過NF-κB信號抑制實驗,神經瘤細胞(Neuro-2a)、胰腺癌細胞(PANC-1)和肝細胞(LO2)的MTT實驗及人源微血管內皮細胞(HMEC-1)的管腔生成實驗對菊花多糖的生物活性進行測定。研究發(fā)現(xiàn)針對核因子NF-κB活性實驗結果顯示,CMTA0
5、S1和CMJA0S1有潛在的免疫激活活性。MTT實驗結果表明雖然菊花多糖對Neuro-2a的抑制作用不如5-氟尿嘧啶,但均對PANC-1具有明顯抑制作用,以CMTA0S3和CMJA0S2抑制率最強,接近70%且呈現(xiàn)出良好的濃度依賴性,同時未見肝毒性??寡苌苫钚匝芯勘砻?CMTA0S3、CMJA0S1和CMJA0S2均能明顯抑制HMEC-1細胞的管腔生成。
本課題首次從三種菊花中分離獲得9種均一多糖,并對其生物學活性進行了初
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