1、本文采用聚乙二醇（PEG）400作為沉淀劑，雙醛淀粉（DAS）作為交聯(lián)劑，牛血清白蛋白（BSA）作為保護(hù)劑，制備了酵母及曲霉來源的β-半乳糖苷酶CLEAs。研究了PEG400濃度、DAS濃度及氧化度、BSA添加量、交聯(lián)溫度和時(shí)間等制備條件對(duì)CLEAs活性的影響；表征了CLEAs結(jié)構(gòu)、最適pH、最適溫度、熱穩(wěn)定性與動(dòng)力學(xué)過程；考察了CLEAs水解乳糖與合成低聚半乳糖（GOS）過程；開發(fā)了β-半乳糖苷酶CLEAs口服制劑，研究了制備條件對(duì)口

2、服制劑抗酸性與在模擬腸液中活性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　?。?）采用單因素法得到酵母和曲霉β-半乳糖苷酶CLEAs的最優(yōu)制備條件均為：PEG400濃度為75％（v/v），DAS濃度為10%（w/w），氧化度為80%，BSA添加質(zhì)量比（酶/BSA）為1:8，交聯(lián)溫度為室溫，交聯(lián)時(shí)間為1h，最終CLEAs的活力保留分別高達(dá)53.84%和55.25%。
　?。?）酵母和曲霉β-半乳糖苷酶CLEAs的熱穩(wěn)定性都有所提高，但后者其熱穩(wěn)

3、定性的提高相對(duì)較大；CLEAs與底物親和力都有所減弱，但是曲霉β-半乳糖苷酶CLEAs底物親和能力相對(duì)較高；固定化過程對(duì)酵母β-半乳糖苷酶kcat變化不大，但曲霉β-半乳糖苷酶kcat明顯減少，這與酵母和曲霉β-半乳糖苷酶CLEAs結(jié)構(gòu)不同有關(guān)。
　　（3）曲霉β-半乳糖苷酶CLEAs較其游離酶具有更強(qiáng)的乳糖水解能力，10h的水解量是游離酶的近2倍，且重復(fù)使用性較酵母β-半乳糖苷酶CLEAs好。合成GOS研究結(jié)果表明，酶濃度越高G