轉(zhuǎn)化植物甾醇單產(chǎn)雄甾雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮菌株的誘變選育及產(chǎn)物初步提取.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、甾體激素藥物主要有腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、蛋白同化激素三大類,對機體起著非常重要的調(diào)節(jié)作用,在世界范圍內(nèi)其產(chǎn)量僅次于抗生素。以油脂工業(yè)副產(chǎn)物大豆油腳中蘊藏的植物甾醇為原料,通過微生物轉(zhuǎn)化為關(guān)鍵甾體藥物中間體,是甾體藥物生產(chǎn)的優(yōu)勢途徑。在實驗室一株能有效以植物甾醇為底物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)雄甾-1,4-二烯.3,17-二酮(ADD)的菌株的基礎(chǔ)上進行誘變篩選出一株轉(zhuǎn)化植物甾醇單產(chǎn)ADD突變株,對其發(fā)酵特性進行研究,并對底物ADD的提取分離進行初步探索

2、。
   主要工作包括以下3個方面:
   1、采用紫外誘變篩選得到轉(zhuǎn)化植物甾醇單產(chǎn)ADD的突變株Mycobacteriumsp.uv-11,在其基礎(chǔ)上進行紫外-亞硝基胍復(fù)合誘變的到一株穩(wěn)定單產(chǎn)ADD的突變菌株Mycobacterium sp.uv-11-12,在甾醇添加量1%時,ADD濃度最高達到0.87g/L,生成率提高了約40%,而AD在發(fā)酵5天后幾乎檢測不到。
   2、根據(jù)出發(fā)菌株培養(yǎng)條件進行優(yōu)化最終確

3、定產(chǎn)物最佳轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基(%):植物甾醇1.0,葡萄糖1.0,蛋白胨1.0,K2HPO40.3,MgSO40.02,MnCl25×10-5,卵磷脂0.4,pH7.0,10%的接種量,30℃,轉(zhuǎn)速200 r/min下發(fā)酵7天,優(yōu)化后產(chǎn)物ADD濃度最高達到1.44g/L,生成率為21.73%,比原培養(yǎng)基提高了72%。
   3、確定了大孔樹脂Amberlite xad-7粗提產(chǎn)物ADD工藝,粗樣品中ADD含量為66.6%,幾乎檢測不到A

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