1、本文利用葡萄球菌特異性基因16S rRNA、金黃色葡萄球菌屬特異性coa基因、甲氧西林耐藥性mecA基因以及腸毒素sea、seb、sec基因為檢測靶點,開發(fā)了一種能同時檢測金黃色葡萄球菌甲氧西林抗性和腸毒素A、B、C的多重PCR方法。并通過對71株金黃色葡萄球菌和51株非金黃色葡萄球菌菌株進行檢測,來評價該方法的性能。16S rRNA和coa基因在金黃色葡萄球菌中出現(xiàn)率100％(71/71),腸毒素sea基因出現(xiàn)率47.9%(34/71

2、),seb基因的出現(xiàn)率5.6%(4/71),sec基因的出現(xiàn)率8.5%(6/71),甲氧西林抗性基因mecA的出現(xiàn)率為39.4%(28/71)。本方法檢測金黃色葡萄球菌DNA的靈敏度為104.5 pg/PCR,菌落靈敏度為2.4×103 CFU/ml。檢測準確率為98.6%?？稍?-4小時之內完成包括鑒定金黃色葡萄球菌、鑒定金黃色葡萄球菌甲氧西林抗性和鑒定金黃色葡萄球菌A、B、C三種腸毒素等5項指標。本研究還采用基因芯片技術,在多重PC