1、基因表達調控的研究是分子生物學的一個核心課題。目前的研究主要集中在基因序列本身相關的啟動子和3’—UTR上，但基因序列本身并不足以完全解釋基因表達的調控。近年來有研究表明基因的表達與其在染色體上所處的位置有關，但是尚未有系統(tǒng)的研究。 要系統(tǒng)地開展位置效應的研究，需要在染色體不同位置上插入相同報告基因的一系列突變體。酵母基因敲除計劃（Guri G et al．，2002）所得到的酵母敲除菌株充分的滿足了本論文的研究需求。該計劃用一

2、個相同的報告基因KanMX4 module分別替換了酵母基因組近6000個基因。因此本論文選擇該計劃產生的50株釀酒酵母1號染色體基因敲除的雜合二倍體BY4743作為實驗材料，首次較大規(guī)模地開展了釀酒酵母1號染色體基因表達的位置效應的研究，初步探討了基因的表達與其在染色體上的位置之間的關系。 本文采用多重Taqman探針法real—time qPCR技術作為檢測基因表達的手段，建立了三重Taqman探針法real—time qP

3、CR檢測基因表達的實驗體系。經過預實驗充分檢測了影響三重real—time qPCR準確性的各種因素，結果表明該實驗體系非常好的滿足了準確定量的要求。 通過real—time qPCR實驗檢測報告基因表達量，對表達數(shù)據(jù)的分析結果如下： 1）利用絕對定量標準曲線分析原基因啟動子的表達。結果顯示，50個菌株里面只有3個菌株檢測到了原基因的表達產物。 2）分析KanMX4 module報告基因的表達。結果顯示，在50個

4、基因位置上，KanMX4 module的表達各不相同，但相對均一。 3）分析比較原始啟動子與KanMX4 module啟動子的強弱。結果表明，只有在原基因表達比KanMX4 module表達明顯高的位置上，原基因啟動子才參與KanMX4 module的表達。 4）基因表達位置效應的分析。結果顯示，KanMX4 module的表達大部分高于原基因的表達水平。將代表位置效應的KanMX4 module的表達與代表基因受各種調

5、控因素綜合影響的原基因的表達作相關性分析，結果為R2=0．0363。 5）基因的表達與基因之間的距離相關性弱（R2=0）。 綜上所述，我們的研究結果表明，由于KanMX4 module所帶的啟動子普遍強于原基因的啟動子，得到的表達結果比原基因要高，但比較均一；可以看到KanMX4 module在染色體的不同位置時存在位置效應，但是效應比較弱；位置效應的分析結果表明，在基因表達的調控因素里面，基因的表達與位置并沒有顯著的相