1、第一部分 DAHP下調(diào)MCAO模型中NOS通路的抗凋亡神經(jīng)保護(hù)作用
　　目的: BH4，作為NOS的輔因子，參與調(diào)節(jié)NO的合成，且GTPCH-Ⅰ為BH4體內(nèi)從頭合成的關(guān)鍵限速酶。本實(shí)驗(yàn)使用DAHP，GTPCH-1的抑制劑，通過來抑制BH4從頭合成來下調(diào)NOS和NO的產(chǎn)生，進(jìn)而研究DAHP對缺血性中風(fēng)的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
　　方法: DAHP預(yù)保護(hù)12h，術(shù)后24h麻醉大鼠取腦，運(yùn)用核磁共振成像(MRI)技術(shù)、TTC染色、TUNE

2、L試驗(yàn)、免疫組化、免疫熒光、western blot和RT-PCR技術(shù)，檢測抗凋亡關(guān)鍵蛋白和抗炎因子表達(dá)，以及評估損傷后腦梗死與水腫范圍。結(jié)果:作為BH4從頭合成關(guān)鍵酶GTPCH-Ⅰ的抑制劑，DAHP可有效下調(diào)MCAO/R后損傷區(qū)GTPCH-Ⅰ，iNOS和nNOS的表達(dá)，但BH4不涉及損傷后早期eNOS合成。與MCAO損傷組相比，DAHP治療能減少腦梗死和水腫范圍的。TUNEL數(shù)據(jù)以及凋亡相關(guān)關(guān)鍵蛋白表達(dá)量，說明DAHP有抗凋亡的作用;

3、同時(shí)，免疫組化和Western Blot數(shù)據(jù)均反映TP有下調(diào)NF-kB/COX-2/iNOS抗炎作用。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)中，DAHP可以通過稀釋iNOS和nNOS由MCAO/R損傷引起的表達(dá)上調(diào)，并可能通過下調(diào)NF-kB/COX-2/iNOS炎癥相關(guān)通路，來實(shí)現(xiàn)其抗凋亡的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　第二部分 TP通過PI3K/Akt介導(dǎo)體內(nèi)外腦缺血缺氧再灌注模型的抗炎神經(jīng)保護(hù)作用
　　目的:探討雷公藤甲素(TP)對大鼠局灶性腦

4、缺血再灌注模型和離體PC12細(xì)胞的在缺氧條件下的抗炎保護(hù)作用
　　方法:在體實(shí)驗(yàn)，30只SD大鼠分為三組:假手術(shù)組、MCAO損傷組、MCAO+TP治療組。 TP12h預(yù)保護(hù)，大鼠腦缺血1.5h再灌注24h后，利用MRI技術(shù)和TTC染色測定腦梗死的位置和范圍，同時(shí)參照Longa神經(jīng)功能評分法，進(jìn)行行為學(xué)檢測。另外，通過TUNEL試驗(yàn)、免疫組化、免疫熒光、Western Blot和RT-PCR技術(shù)進(jìn)行指標(biāo)檢測。離體實(shí)驗(yàn)，通過MTT篩選

5、合適的TP給藥濃度范圍;不同劑量TP預(yù)保護(hù)24h，PC12細(xì)胞缺氧2h，培養(yǎng)12h后檢測炎癥反應(yīng)與凋亡壞死情況，研究TP在體外治療的作用機(jī)制并篩選最優(yōu)給藥劑量。
　　結(jié)果:在體實(shí)驗(yàn)中，與MCAO損傷組相比:TTC染色顯示，TP治療能減少梗死范圍;神經(jīng)癥狀行為學(xué)評分顯示，TP治療可以減輕神經(jīng)功能損傷;TUNEL實(shí)驗(yàn)顯示，TP有抗凋亡的作用;同時(shí)，免疫組化與熒光、western blot和RT-PCR數(shù)據(jù)均反映TP的抗炎作用;檢測PI

6、3K/AKT通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)pAkt/Akt，發(fā)現(xiàn)TP可明顯上調(diào)MCAO/R損傷后Akt的磷酸化，起到促進(jìn)存活抗凋亡的神經(jīng)保護(hù)作用。離體實(shí)驗(yàn)中，TP治療組有明顯的抗炎抗凋亡壞死作用（與損傷組比較，P＜0.05），且綜合分析0.4ng/ml可以作為日后體外研究的TP的給藥劑量。
　　結(jié)論:雷公藤甲素預(yù)保護(hù)對大鼠MCAO模型有抗炎保護(hù)作用，且通過PI3K/AKT通路抗凋亡。同時(shí)，其對PC12細(xì)胞缺氧模型同樣具有抗凋亡作用，且0.4ng