1、氧化/抗氧化失衡在肺纖維化發(fā)病機制中發(fā)揮著重要的作用。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS）是谷胱甘肽（glutathione,GSH）合成反應的限速酶，認為是非常重要的抗氧化酶；體外細胞學培養(yǎng)研究認為紅系衍生核因子相關因子-2（NF-E2 related factor2,Nrf2）可以調控抗氧化酶的表達。
　　本實驗室前期動物實驗研究表明苦參堿具有抗炎、抗纖維化作用，但

2、其調控Nrf2表達的具體機制不明。
　　目的：本研究探討苦參堿通過調控Nrf2對人胚肺成纖維細胞γ-GCS表達的影響，為尋找有效的抗肺纖維化藥物提供臨床治療的實驗基礎。
　　方法：體外培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞MRC-5至指數生長期，分為空白對照組、苦參堿組、苦參堿+SiRNA干預組?？瞻讓φ战M為A組：細胞使用MEM/NEAA培養(yǎng)基加10％FBS(Hyclone)培養(yǎng)；苦參堿組：正常培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞加入苦參堿；苦參堿+Si

3、RNA干預組：正常培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞加入苦參堿并加入SiRNA沉默Nrf2 mRNA。根據苦參堿濃度進行亞分組：苦參堿組中0.25mmol/L Mat為B組、0.5 mmol/LMat為C組、1.0 mmol/LMat為D組；苦參堿+SiRNA干預組中0.25mmol/L Mat為E組、0.5 mmol/LMat為F組、1.0 mmol/LMat為G組。以上各組細胞，經苦參堿處理1、2、4、8小時后，細胞Nrf2、γ-GCSmRNA

4、表達水平使用RT-PCR檢測，細胞Nrf2、γ-GCS蛋白表達水平使用Western blot檢測。
　　結果：
　?。?）人胚肺成纖維細胞中γ-GCSmRNA、Nrf2mRNA表達：A組低于 B、C、D組（P＜0.05）；表達隨Mat濃度增大呈上升趨勢，以4h較高，第8h較低，但仍高于空白組（P＜0.05）。
　?。?）人胚肺成纖維細胞中γ-GCS蛋白、Nrf2蛋白表達：A組低于 B、C、D組（P＜0.05）；表達隨