miR-711對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞侵襲遷移及增殖的影響.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:利用 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、MTT實(shí)驗(yàn)分別探討 miR-711在人胃癌細(xì)胞SGC-7901侵襲遷移及增殖中的作用,為miR-711在胃癌中防治作用提供理論依據(jù)。
  方法:通過脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染法將miR-711過表達(dá)(miR-711 mimics)、miR-711抑制表達(dá)(miR-711 inhibitors)、miRNA空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞株SGC-7901,以miRNA空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組作為陰性對(duì)照組(NC組

2、),以空白轉(zhuǎn)染組作為空白對(duì)照組(control組)。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率,Real-time PCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染后各組中miR-711的表達(dá),Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力,MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力。
  結(jié)果:
  (1)轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,在熒光顯微鏡下觀察計(jì)數(shù),miR-711過表達(dá)及miR-711抑制表達(dá)、miRNA空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞SGC-7901,轉(zhuǎn)染

3、效率達(dá)75%以上;Real-time PCR檢測(cè)不同轉(zhuǎn)染組中miR-711的相對(duì)表達(dá)量,miR-711過表達(dá)轉(zhuǎn)染組、miR-711抑制表達(dá)轉(zhuǎn)染組及陰性對(duì)照組中的miR-711表達(dá)量分別是空白對(duì)照組的7658.6倍、0.35倍、1.2倍。
  (2)Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(轉(zhuǎn)染48小時(shí)后即細(xì)胞接種24h后,平均每低倍鏡*100倍下觀察):1)與空白對(duì)照組穿膜細(xì)胞數(shù)39.5±1.9比較,miR-711過表達(dá)轉(zhuǎn)染組穿膜細(xì)胞數(shù)

4、12.1±1.4,明顯下降,兩者比較 P<0.05;2) miR-711抑制表達(dá)轉(zhuǎn)染組穿膜細(xì)胞數(shù)為53.5±2.5,與空白對(duì)照組39.5±1.9比較有顯著性差異P<0.05;3)空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組穿膜細(xì)胞數(shù)33.5±2.1,與空白對(duì)照組39.5±1.9比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05。
 ?。?)劃痕實(shí)驗(yàn)顯示:劃痕后24小時(shí)miR-711過表達(dá)轉(zhuǎn)染組SGC-7901細(xì)胞愈合率為23.8%±3.2%,與空白對(duì)照組36.5%±2.6%比較

5、P<0.05;miR-711抑制表達(dá)組SGC-7901細(xì)胞愈合率為48.7%±4.5%,與空白對(duì)照組36.5%±2.6%比較P<0.05;48小時(shí)miR-711過表達(dá)轉(zhuǎn)染組SGC-7901細(xì)胞愈合率為56.2%±3.5%,與空白組76.3%±2.5%比較 P<0.05; miR-711抑制表達(dá)轉(zhuǎn)染組SGC-7901細(xì)胞愈合率為88.7%±4.3%,與空白組76.3%±2.5%比較P<0.05。
  (4)MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示SGC-

6、7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-711過表達(dá)后48h、72h、96h(即接種后24h、48h、72h),其增殖抑制率呈時(shí)間依賴性增加,依次為7.2%、8.3%、10.7%,與空白轉(zhuǎn)染組比較,均P<0.05;SGC-7901細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-711抑制表達(dá)后48h、72h、96h,其增殖率呈時(shí)間依賴性增加,依次為6.5%、8.6%、9.3%,與空白轉(zhuǎn)染組比較,均P<0.05;陰性對(duì)照組與空白轉(zhuǎn)染組比較無顯著性差異(P>0.05)。
  結(jié)論:

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