茉莉酸甲酯對胃癌SGC-7901細胞增殖的影響及其機制的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩51頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:初步探討茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MJ)對胃癌SGC-7901細胞生長的影響及機制。
  方法:人胃癌SGC-7901細胞常規(guī)培養(yǎng)于含10%小牛血清、青霉素-鏈霉素溶液(100X) RPMI1640培養(yǎng)液中,在37℃、5%CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。實驗分組:陰性對照組、溶劑對照組、茉莉酸甲酯組(MJ0.5 mmol/L,1.0 mmol/L,2.0mmol/L)、陽性對照組(DDP2.5 mg/L)、

2、辣椒素受體拮抗劑(capsazepine,Cap)預(yù)處理組。(1)四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測各組細胞作用6h、12 h和24 h體外增殖情況;(2) Hoechst33258熒光染色法觀察凋亡細胞核的形態(tài)學變化;(3)AnnexinV-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測細胞的凋亡率;(4)蛋白質(zhì)印跡方法檢測凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表達;(5)免疫細胞化學法檢測凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表達。
  結(jié)果:

3、(1)不同濃度的茉莉酸甲酯作用于胃癌SGC-7901細胞株6h、12h和24 h后,細胞生長受到不同程度的抑制。抑制率隨濃度的升高而升高(r=0.983,P<0.05);隨時間的延長而升高(r=0.923,P<0.05),與溶劑對照組和陰性對照組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),故呈劑量——時間依賴關(guān)系。在相同作用時間下,1.0 mmol/L,2.0 mmol/L MJ抑制效果明顯強于2.5 mg/L DDP陽性對照組,差異具有

4、統(tǒng)計學意義(P<0.05)。辣椒素受體拮抗劑預(yù)處理后,MJ對腫瘤細胞的抑制作用被消除,與單獨茉莉酸甲酯組相比,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)藥物作用24h后,行Hoechst33258染色可見陰性對照組和溶劑對照組細胞細胞核呈卵圓形,染色均勻,茉莉酸甲酯組可見部分細胞核熒光增強,胞核縮小呈濃縮現(xiàn)象,細胞核的染色質(zhì)高度凝聚、熒光顯著增強,并有部分細胞核邊緣化,甚至裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體。辣椒素受體拮抗劑預(yù)處理后,與單獨MJ組

5、相比,凋亡細胞數(shù)明顯減少。(3)流式細胞術(shù)分析顯示:陰性對照組和溶劑對照組凋亡率相近,兩者差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。0.5 mmol/L,1.0 mmol/L及2mmol/L低中高三個濃度MJ作用于SGC-7901細胞24 h后,隨著MJ濃度的增加,細胞凋亡率明顯升高(r=0.920,P<0.05),與溶劑對照組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),1.0 mmol/L,2.0 mmol/L MJ組凋亡率高于DDP陽性對照組,

6、兩者相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);辣椒素受體拮抗劑預(yù)處理后,凋亡率下降,與單獨MJ組相比,具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(4)蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示,Pro-Caspase-9、Pro-Caspase-3及Caspase-3、Caspase-9的表達量增加,與溶劑對照組和陰性對照組相比,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);辣椒素受體拮抗劑預(yù)處理后,凋亡蛋白相對表達量下降,與單獨MJ組相比,具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(5)

7、免疫細胞化學染色結(jié)果顯示:Bcl-2、Bax在SGC-7901細胞胞漿中均有表達;2mmol/LMJ作用24h后,Bcl-2蛋白表達降低,Bax蛋白表達升高,與溶劑對照組相比差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);辣椒素受體拮抗劑預(yù)處理后,Bcl-2蛋白表達升高,Bax蛋白表達降低,與單獨MJ組相比,具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  結(jié)論:茉莉酸甲酯對人胃癌SGC-7901細胞株具有生長抑制、誘導(dǎo)凋亡作用。茉莉酸甲酯誘導(dǎo)人胃癌SG

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論