1、血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人類健康和阻礙疫區(qū)社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的寄生蟲病，目前全球仍約有2.07億人受感染，7.79億人受威脅。上世紀(jì)80年代以來(lái)，高效、安全的血吸蟲病化療藥物吡喹酮的應(yīng)用加之其它防治措施的有效實(shí)施，我國(guó)疫區(qū)日本血吸蟲感染率和感染度大幅度下降，但目前我國(guó)仍有血吸蟲病病人67.13萬(wàn)。血吸蟲病至今仍然是世界和我國(guó)主要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。 診斷在血吸蟲病防治活動(dòng)中始終處于中心位置，它不僅為疫區(qū)分類提供標(biāo)準(zhǔn)，還為防治活動(dòng)的各環(huán)節(jié)提

2、供必不可少的信息和科學(xué)依據(jù)，包括在個(gè)體水平上確定化療對(duì)象、考核化療效果，更重要的是在社區(qū)(群體)水平上監(jiān)測(cè)疫情變化、評(píng)估流行態(tài)勢(shì)和考核疾病控制效果等。改良加藤厚涂片糞檢法(Kato-Katz法)、間接紅血球凝集試驗(yàn)(Indirect Hemagglutination Assay,IHA)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)是目前我國(guó)血吸蟲病防治實(shí)踐中最常用的三種診斷方法。

3、 基于病原檢查的Kato-Katz法是直接診斷方法，它提供調(diào)查時(shí)“點(diǎn)”的感染狀態(tài)信息。迄今為止，病原學(xué)檢查仍是血吸蟲病確定診斷的唯一途徑和手段。雖然在低流行水平狀態(tài)下，病原學(xué)檢查的敏感性受到質(zhì)疑，但因其不可替代的“確定診斷”價(jià)值，依然是我國(guó)目前疫區(qū)分類及評(píng)價(jià)疫區(qū)真實(shí)流行狀態(tài)的唯一技術(shù)途徑。目前，我國(guó)絕大多數(shù)血吸蟲病疫區(qū)處于低流行狀態(tài)，這種情況下，采用常規(guī)Kato-Katz法(1檢3片)確診病人，極易漏檢，評(píng)估疫情，明顯低估。

4、 基于抗體檢出的IHA和ELISA是間接診斷方法，是所謂“期”的感染提示，其檢測(cè)的定性結(jié)果不能區(qū)別現(xiàn)癥感染和既往感染，在作為流行病學(xué)用途時(shí)，也難以提供真實(shí)的感染率或傳播強(qiáng)度信息。雖然目前還沒(méi)有一項(xiàng)免疫學(xué)診斷試驗(yàn)可以真正“替代”病原學(xué)診斷技術(shù)，但其敏感性提示的診斷意義，在一定程度上彌補(bǔ)了病原學(xué)診斷敏感性方面的不足，并賦予了其強(qiáng)勁的發(fā)展動(dòng)力，在簡(jiǎn)便、安全的化療措施易于實(shí)施和追求以疫情控制為主要目標(biāo)的條件下，尤其如此。 實(shí)際上，這兩

5、類診斷途徑普遍地共同應(yīng)用于我國(guó)當(dāng)前血吸蟲病防治活動(dòng)中，因各自都具有特定的優(yōu)缺點(diǎn)和局限性，使得結(jié)果解釋在相當(dāng)程度上帶有主觀色彩，甚至產(chǎn)生一定的矛盾和混亂，從而影響決策者的取舍。 目前，我國(guó)正處在實(shí)現(xiàn)《全國(guó)預(yù)防控制血吸蟲病中長(zhǎng)期規(guī)劃綱要(2004～2015年)》目標(biāo)的進(jìn)程中，防治工作者，尤其是疾病控制管理者與決策者比以往任何時(shí)候都迫切地希冀獲得較為“精確”的疫區(qū)流行信息，以及時(shí)跟進(jìn)不斷變化的血吸蟲病流行態(tài)勢(shì)，指導(dǎo)血吸蟲病防治工作。因

6、此，作為提供信息的關(guān)鍵工具-診斷方法的科學(xué)、合理應(yīng)用顯得尤為重要。本項(xiàng)研究正是應(yīng)對(duì)這一需求，以更加貼近防治活動(dòng)的視角，針對(duì)當(dāng)前血吸蟲病診斷在防治活動(dòng)中應(yīng)用的若干問(wèn)題加以研究和討論。本研究設(shè)計(jì)涉及的診斷試驗(yàn)為目前我國(guó)血吸蟲病防治中最常用的三種方法：Kato-Katz法、IHA和ELISA，研究關(guān)注的重點(diǎn)置于診斷試驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)分析和解釋。主要進(jìn)行了以下三方面的研究： 一、常規(guī)改良加藤厚涂片糞檢法(Kato-Katz法) 低估

7、日本血吸蟲病疫區(qū)人群血吸蟲感染率的分析和評(píng)價(jià)在4個(gè)低感染度、不同流行程度(分別為一、二、三類疫區(qū)村)的血吸蟲病疫區(qū)村，采用“2檢6片”Kato-Katz法(2次糞樣，每次糞樣制作3張Kato-Katz片)對(duì)疫區(qū)常住居民進(jìn)行整群調(diào)查，并以“2檢6片”結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，分析、評(píng)估在我國(guó)當(dāng)前血吸蟲病流行狀態(tài)下，Ka-to-Katz法對(duì)不同流行區(qū)疾病流行性的低估程度。 結(jié)果顯示：在一、二類疫區(qū)(試區(qū)1、2、3)，1張Kato-Katz片對(duì)人

8、群血吸蟲感染率的平均低估率高達(dá)50％以上，即使增加到3張Kato-Katz片(目前大多數(shù)疫區(qū)為減少漏檢而采用的片數(shù))亦低估了17.0％-25.3％，有22.5％～33.6％的低感染度者(EPG≤40)不能檢出；在三類疫區(qū)(試區(qū)4)，1張Kato-Katz片平均低估率高達(dá)70％以上；3張Kato-Katz片達(dá)33.7％，有42.5％的低感染度者(EPG≤40)漏檢。在群體水平上，采用相同Kato-Katz片數(shù)情況下，陽(yáng)性檢出率主要取決于K

9、ato-Katz片數(shù)而不是糞檢次數(shù)。感染度可能是Kato-Katz法低估疫區(qū)人群血吸蟲感染率、確定Kato-Katz法合適應(yīng)用片數(shù)的關(guān)鍵因素，病人感染度越低，得到正確診斷所需的Kato-Katz片數(shù)越多；而且，在感染度類似的疫區(qū)，盡管居民的感染率相差較大(一或二類疫區(qū))，但不同Kato-Katz片數(shù)對(duì)感染率的低估率及不同感染度病人確診所需Kato-Katz片數(shù)類似。 所獲結(jié)果提示現(xiàn)行的常規(guī)“1檢3片”Kato-Katz法，無(wú)論在

10、哪類疫區(qū)應(yīng)用，均嚴(yán)重低估了疫區(qū)感染率，其低估程度隨著疫區(qū)流行程度的降低而增加.而且結(jié)果有助于了解目前疫情狀態(tài)下，糞檢次數(shù)、Kato-Katz片數(shù)及感染度等諸多因素對(duì)Kato-Katz法評(píng)估感染率的影響；并且對(duì)今后現(xiàn)場(chǎng)防治中正確應(yīng)用Kato-Katz法、合理評(píng)估疫情及在此基礎(chǔ)上確定防治措施有一定的指導(dǎo)意義；同時(shí)為建立日本血吸蟲卵計(jì)量模型提供科學(xué)依據(jù)。 二、IHA和ELISA現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用價(jià)值的分析與評(píng)價(jià) 在上述之一的一類血吸蟲病

11、疫區(qū)村(試區(qū)1)，同時(shí)采用Kato-Katz法、IHA和ELISA3種方法對(duì)人群進(jìn)行連續(xù)2年的縱向調(diào)查，開(kāi)展定量血清流行病學(xué)研究。著重從定量方面，探討血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果的群體特征與疫區(qū)疫情、傳播狀態(tài)或人群感染趨勢(shì)的關(guān)系，科學(xué)解釋抗體陽(yáng)性率、抗體水平變化在血吸蟲病流行病學(xué)調(diào)查中的意義和作用。 結(jié)果顯示：IHA和ELISA在現(xiàn)場(chǎng)實(shí)際應(yīng)用時(shí)，以“2檢6片”Kato-Katz法為金標(biāo)準(zhǔn)，它們的敏感度均較高(>80％)，特異度低(<60％)，

12、陰性預(yù)測(cè)值好(93.1％～96.8％)。其中，對(duì)連續(xù)2年Kato-Katz法檢查結(jié)果均為陽(yáng)性和陰性的人群，IHA、ELISA的敏感度和陰性預(yù)測(cè)值則更高，分別達(dá)94.6％和99.2％。IHA、ELISA的特異度隨著人群年齡的增加而降低，在低年齡組人群(<15歲人群)的特異度最高。IHA和ELISA的人群抗體陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于糞檢陽(yáng)性率，但其年齡分布趨勢(shì)均與Kato-Katz法糞檢陽(yáng)性率的年齡分布一致。IHA和ELISA的定性結(jié)果(陰性/陽(yáng)性)與

13、Kato-Katz法結(jié)果一致性較差，其Kappa值低于0.24(0.15～0.24)。而且IHA和ELISA的假陽(yáng)性率較高(42.8％～61.1％)，并存在假陰性(12.9％～21.8％).感染者(蟲卵陽(yáng)性)治療后，IHA和ELISA的抗體陽(yáng)性率下降均緩慢。在某一時(shí)點(diǎn)上，IHA和ELISA的抗體水平難以反映個(gè)體或人群感染度，但人群抗體水平變化可反映人群感染狀態(tài)的變化。結(jié)果提示在我國(guó)目前疫情狀態(tài)下，IHA和ELISA在群體水平上更具應(yīng)用價(jià)

14、值；而應(yīng)用抗體檢測(cè)“篩查”抗體陽(yáng)性，以確定疫區(qū)定期常規(guī)化療的對(duì)象，或“抗體篩查法”(人群抗體檢測(cè)后，抗體陽(yáng)性再做病原學(xué)檢查)確定疫區(qū)人群感染率，均有必要進(jìn)一步探討.我們認(rèn)為，應(yīng)開(kāi)展各類疫區(qū)非感染人群的血清學(xué)研究，掌握疫區(qū)人群抗體水平的基線數(shù)據(jù)，以建立真正適于現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用評(píng)估的“免疫學(xué)診斷技術(shù)評(píng)估方案”。今后血吸蟲病血清流行病學(xué)研究值得探索的方向應(yīng)包括：建立血吸蟲病疫區(qū)血清學(xué)定量檢測(cè)系統(tǒng)，發(fā)展和完善血吸蟲病疫情評(píng)估和監(jiān)測(cè)體系，并根據(jù)人群抗體水

15、平特征構(gòu)建血清學(xué)診斷試驗(yàn)確定疫區(qū)化療人群、反映疫區(qū)流行狀態(tài)及監(jiān)測(cè)疫情變化和防治效果的模型。 本研究結(jié)果進(jìn)一步詮釋了抗體檢測(cè)法的檢測(cè)結(jié)果及其應(yīng)用價(jià)值，同時(shí)為發(fā)展血清學(xué)定量抗體檢測(cè)試驗(yàn)系統(tǒng)提供了理論依據(jù)。 三、IHA篩查法確定日本血吸蟲病疫區(qū)人群感染率的評(píng)價(jià) 選擇1個(gè)二類血吸蟲病疫區(qū)村(試區(qū)5)，采用“2檢12片”Kato-Katz法和IHA對(duì)人群同時(shí)進(jìn)行調(diào)查。以“2檢12片”結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)分析目前常規(guī)“1檢3片

16、”Kato-Katz法的陽(yáng)性檢出率與低估率、IHA的診斷效率及IHA與Kato-Katz法結(jié)果的相關(guān)性，從而評(píng)價(jià)目前我國(guó)疫情監(jiān)測(cè)點(diǎn)普遍采用的IHA篩查法確定血吸蟲病疫區(qū)人群感染率方法的可信性和科學(xué)性。 結(jié)果顯示，以“2檢12片”結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，目前常規(guī)“1檢3片”Kato-Katz法對(duì)人群血吸蟲感染率的平均低估率高達(dá)32.3％；增加糞檢次數(shù)可提高陽(yáng)性檢出率，2次糞檢較1次糞檢增加的檢出率為30.2％。IHA的敏感度和特異度分別為6

17、9.6％和88.4％，陰性預(yù)測(cè)值為96.8％，但陽(yáng)性預(yù)測(cè)值較低(36.8％)，假陰性高達(dá)30.4％，假陽(yáng)性為11.6％。由于IHA和“1檢3片”Kato-Katz法均存在漏檢，IHA篩查法對(duì)試點(diǎn)區(qū)人群感染率估算的漏檢率達(dá)35.8％。結(jié)果提示，應(yīng)用IHA篩查法確定疫區(qū)人群感染率與人群實(shí)際感染狀況有較大的偏差.而且，由于IHA存在著明顯的假陰性與假陽(yáng)性，使用該方法診斷某一個(gè)體是否感染時(shí)的真實(shí)性較小，將其作為糞檢前初篩工具的價(jià)值同樣需要謹(jǐn)慎評(píng)