1、真菌耐藥性已成為真菌感染治療上一個日益嚴峻的問題，由于麥角甾醇是真菌細胞膜上獨特的脂類成分(在哺乳動物細胞膜中不含麥角甾醇而只含膽固醇)，因此一直被作為設(shè)計抗真菌藥物的最佳靶標之一。
　　 真菌細胞中的脂類(包括麥角甾醇)合成后轉(zhuǎn)運到細胞膜的途徑有兩種：小泡轉(zhuǎn)運和非小泡轉(zhuǎn)運。非小泡轉(zhuǎn)運及其調(diào)控機制一直沒有清楚闡述，近期的研究發(fā)現(xiàn)：ABC轉(zhuǎn)運蛋白(ATP-binding cassette transporter)，除了具有結(jié)合和外

2、排底物分子(包括藥物分子)的泵功能外，還與細胞中脂類的轉(zhuǎn)運、代謝有著密切關(guān)系。本論文利用模式真菌細胞釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，初步研究了其中重要的ABC轉(zhuǎn)運蛋白Pdr5p對酵母細胞膜中麥角甾醇水平調(diào)節(jié)的機制。
　　 首先，論文通過同源雙交換的方法分別構(gòu)建pdr5、pdr10，yor1敲除菌株。耐藥性實驗表明敲除PDR5會導致菌株對氟康唑的抗性下降，但是對多烯藥物兩性霉素B的抗性上升。由于兩性霉

3、素B與酵母細胞膜上的麥角甾醇結(jié)合形成孔道，使細胞內(nèi)的物質(zhì)外流導致死亡，本論文通過高效液相色譜方法分析了pdr5敲除菌株中細胞膜上的麥角甾醇含量，發(fā)現(xiàn)較野生菌株下降約30％，但pdr10，yor1單敲菌株的細胞膜麥角甾醇含量均未發(fā)生顯著改變。說明Pdr5p對麥角甾醇的影響不是ABC轉(zhuǎn)運蛋白家族的共有特性。
　　 在此基礎(chǔ)上，論文通過實時熒光定量PCR方法研究了敲除PDR5后對麥角甾醇合成、轉(zhuǎn)運途徑上的基因及其它一些相關(guān)基因在轉(zhuǎn)錄水

4、平上表達量的影響。研究發(fā)現(xiàn)麥角甾醇合成基因ERG3的表達下調(diào)，參與麥角甾醇酯化的基因ARE2表達上調(diào)，將酯化麥角甾醇水解為游離麥角甾醇的基因YEH1和YEH2的表達量下調(diào)。說明pdr5敲除后影響了麥角甾醇從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向細胞膜的轉(zhuǎn)運，細胞內(nèi)麥角甾醇的累積導致ERG3表達下調(diào)，以減少麥角甾醇的合成產(chǎn)量；同時還導致ARE2表達上調(diào)和YEH1、YEH2表達下調(diào)，用以將無法轉(zhuǎn)運的麥角甾醇以酯化的形式存儲。
　　 OSH蛋白家族在脂類運輸過程中