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![NHEs基因在LPS致小鼠腹瀉腸管中的表達(dá).pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/d1171f69-2cab-4f99-8182-8feb691a9886/d1171f69-2cab-4f99-8182-8feb691a98861.gif)
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文檔簡介
1、鈉/氫交換泵NHEs是存在于真核細(xì)胞中的一種重要離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)載體,該蛋白載體有多種功能,主要功能有調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)pH、控制細(xì)胞體積大小、負(fù)責(zé)鈉/氫離子的轉(zhuǎn)運(yùn)、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期及細(xì)胞增殖等多種功能。NHEs活性改變會引起機(jī)體Na+吸收障礙,導(dǎo)致腹瀉,調(diào)節(jié)NHEs活性將是預(yù)防和治療腹瀉的一個(gè)新方向。目前關(guān)于NHEs基因與腸管分泌性腹瀉的研究尚少,本文在前人研究的基礎(chǔ)上利用LPS建立動(dòng)物急性腹瀉模型,通過動(dòng)物精神狀態(tài)、糞便排放、腸管蠕動(dòng)和組織形態(tài)學(xué)變
2、化來判定模型的建立;利用分子生物學(xué)的方法(qRT-PCR)對動(dòng)物不同腸管NHEs基因進(jìn)行定量檢測,并分析模型組和對照組腸管NHEs基因的差異表達(dá)。結(jié)果如下:
LPS注射后1h和8h組均出現(xiàn)不同程度的腹瀉,精神萎靡,采食量有所下降,與對照組形成明顯差別;攝像觀察發(fā)現(xiàn):試驗(yàn)組小鼠腸管運(yùn)動(dòng)較劇烈,腸系膜靜脈充血,腸壁明顯水腫,隨著注射時(shí)間的延長,水腫現(xiàn)象更為嚴(yán)重,腸系膜靜脈血管,呈紫黑色;組織學(xué)觀察結(jié)果顯示,LPS注射1h后,黏膜及
3、絨毛排列輕度紊亂,絨毛縮短,無黏膜變性、壞死,出現(xiàn)上皮細(xì)胞下間隙增大,腸腺輕度受損,毛細(xì)血管充血;注射后8h,小腸絨毛明顯水腫,絨毛排列紊亂,絨毛黏膜糜爛脫落,腸腺受損,毛細(xì)血管發(fā)生明顯充血,有炎癥細(xì)胞浸潤;提示LPS成功地誘導(dǎo)小鼠發(fā)生了腹瀉。
qRT-PCR對NHEs基因進(jìn)行定量檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn):小鼠十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸均有NHE2、NHE3、NHE8基因的表達(dá);NHE2基因表達(dá)水平高低:空腸>十二指腸=結(jié)腸>回腸;NHE
4、3基因表達(dá)水平高低:結(jié)腸>十二指腸=空腸>回腸;NHE8基因在各腸管表達(dá)一致;LPS注射1h后上調(diào)十二指腸NHE2基因表達(dá),8h下調(diào)其表達(dá);LPS能下調(diào)回腸、結(jié)腸NHE2基因表達(dá),上調(diào)空腸NHE2基因表達(dá),且依賴作用時(shí)間;LPS均上調(diào)十二指腸、空腸、回腸和結(jié)腸NHE3基因表達(dá),且依賴作用時(shí)間,8h均達(dá)到差異極顯著水平;LPS注射1h后上調(diào)十二指腸NHE8基因表達(dá),8h下調(diào)其表達(dá); LPS上調(diào)空腸、回腸NHE8基因表達(dá),下調(diào)結(jié)腸NHE8基
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