1、腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體(TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)是腫瘤壞死因子超基因家族中重要的一員，它能夠誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，而對(duì)正常細(xì)胞幾乎無(wú)毒性，已成為一種新的具有開(kāi)發(fā)潛力的抗腫瘤藥物。但是，并非所有腫瘤細(xì)胞都對(duì)TRAIL敏感，這使得TRAIL，的開(kāi)發(fā)應(yīng)用受到一定阻礙。因此，腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL敏感性的調(diào)控機(jī)制得到了人們的廣泛關(guān)注。 各項(xiàng)研究均已證實(shí)，PI3K/

2、Akt和Raf/MEK/ERK信號(hào)通路在介導(dǎo)細(xì)胞外刺激到細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)、調(diào)節(jié)基因表達(dá)及抑制凋亡等方面起到了重要的作用。在某些腫瘤細(xì)胞中，用PI3K抑制劑LY294002抑制Akt的活性或用MEK1/2抑制劑抑制ERKl/2的活性均可顯著提高TRAIL引起的細(xì)胞凋亡的比率。 我們首先發(fā)現(xiàn)，在對(duì)TRAIL敏感的U937細(xì)胞中，LY294002能夠降低細(xì)胞對(duì)TRAIL的敏感性，U0126則具有與其相反的作用；兩者共同作用也使細(xì)胞對(duì)TRAI

3、L的敏感性顯著下降。而在對(duì)TRAIL不敏感的K562細(xì)胞中，兩種抑制劑共同作用使得細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)門RAIL敏感型且作用效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于兩種抑制劑單獨(dú)作用的相加。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在兩種細(xì)胞中，PI3K/Akt和MEK/ERK兩條信號(hào)通路之間可能存在著相互作用，共同調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞對(duì)TRAIL的敏感性。 進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在U937細(xì)胞中，TRAIL能夠持續(xù)抑制PI3K/Akt和MEK/ERK兩條信號(hào)通路的磷酸化水平。在K562細(xì)胞中，Akt與

4、ERK1/2磷酸化水平的變化呈現(xiàn)相反的現(xiàn)象，當(dāng)Akt的磷酸化水平在30min內(nèi)達(dá)到最高峰時(shí)，ERK1/2的磷酸化水平降至最低；而在TRAIL刺激后期，前者的磷酸化水平降到低于本底的水平，后者的磷酸化水平則超過(guò)本底水平并持續(xù)至12h。并且，在這兩種腫瘤細(xì)胞中均存在著這樣的現(xiàn)象：PI3K/Akt信號(hào)通路的激活會(huì)對(duì)MEK/ERK信號(hào)通路的活化起到一定的抑制作用。在U937細(xì)胞中過(guò)表達(dá)并激活A(yù)kt能夠抑制ERK1/2的磷酸化水平并促使細(xì)胞更快發(fā)

5、生凋亡；而ERK1/2的持續(xù)激活卻促使細(xì)胞對(duì)TRAIL的敏感性下降。此外，兩條通路均參與調(diào)節(jié)了促凋亡蛋白Bad的磷酸化水平并具有相反的作用。 綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們認(rèn)為，MEK/ERK信號(hào)通路的磷酸化水平是造成U937和K562細(xì)胞對(duì)TRAIL具有不同敏感性的重要原因。當(dāng)細(xì)胞中MEK/ERK信號(hào)通路的磷酸化水平較高時(shí)，細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)TRAIL刺激的不敏感；反之，對(duì)TRAIL的刺激敏感，細(xì)胞走向凋亡。而P13K/Akt信號(hào)通路與ME