1、世界上對(duì)干細(xì)胞的研究已有多年的歷史，它已經(jīng)成為當(dāng)今生命科學(xué)研究的前沿之一。當(dāng)前，由于各種肝病患者不斷增長(zhǎng)和肝臟捐獻(xiàn)器官來(lái)源的缺乏，對(duì)肝干細(xì)胞的研究已經(jīng)成為熱點(diǎn)，這將有助于更好的了解許多肝臟疾病的產(chǎn)生機(jī)理和可能的治療途徑，而胎肝是研究肝干細(xì)胞很好的實(shí)驗(yàn)材料。本文通過(guò)以下三個(gè)方面對(duì)胎肝細(xì)胞的分離，培養(yǎng)，體外誘導(dǎo)分化及體內(nèi)移植進(jìn)行了研究： 1將慢病毒載體plv的CMV啟動(dòng)子替換為人基因組AFP啟動(dòng)子，使該病毒感染胎肝細(xì)胞后，在AFP陽(yáng)

2、性細(xì)胞中表達(dá)綠色熒光蛋白，從而可利用流式細(xì)胞儀分選出表達(dá)AFP即GFP陽(yáng)性的胎肝細(xì)胞。該標(biāo)記篩選系統(tǒng)的建立為進(jìn)一步研究胎肝細(xì)胞的生物學(xué)特性和肝干細(xì)胞的分離和應(yīng)用奠定了良好的基礎(chǔ)。 2為了得到大量用于臨床治療和科學(xué)研究的細(xì)胞，僅靠分離原代細(xì)胞，不僅無(wú)法得到細(xì)胞量的保障，而且樣品不穩(wěn)定，費(fèi)用昂貴。解決該問(wèn)題最好的方法就是建立穩(wěn)定的原代細(xì)胞系，但通常原代分離胚胎來(lái)源的細(xì)胞在培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)分化，增殖能力逐漸減弱直到停止分裂。通過(guò)兩種方