1、研究背景及目的：
　　在哺乳動物NeuroD在腦的發(fā)育中廣泛表達而且是中樞神經系統(tǒng)形成所必須的，尤其是海馬和小腦的顆粒細胞產生過程中尤為重要。神經祖細胞和放射狀膠質細胞中都無NeuroD表達，而在有絲分裂后期細胞可以檢測到其表達，并在變性壞死后期神經系統(tǒng)再生的新生細胞NeuroD的表達量有所增高。本研究即構建NeuroD1慢病毒載體，觀察并驗證NeuroD1對大鼠神經干細胞的表達活性。
　　方法：
　　利用SD大鼠新生

2、鼠腦cDNA模板，設計合成NeuroD的cds區(qū)引物序列，用PCR擴增出目的片段，凝膠回收純化和雙酶切，將NeuroD基因連接在慢病毒表達載體上，并與DH5a細菌同源重組，挑選陽性克隆，小提質粒行基因測序鑒定，大抽質粒后用Lipo2000轉染293細胞，包裝濃縮得到lv-NeuroD1和Lv-Green重組慢病毒；分離孕13-15 dSD大鼠胚胎腦NSCs，無血清培養(yǎng)基(DMEM／F12，含bFGF、EGF、B27等)條件下培養(yǎng)，免疫細

3、胞化學法鑒定神經干細胞；慢病毒轉染SD胎鼠神經干細胞，qPCR法檢測NeuroD1的表達情況。
　　結果：
　　在本實驗中，經檢測我們成功地構建NeuroD1慢病毒表達載體；分離并鑒定了孕14-16天SD大鼠胎鼠腦NSCs，并在體外培養(yǎng)增殖；NeuroD1慢病毒轉染神經干細胞后，能在神經干細胞中過量表達。
　　結論：
　　成功構建了大鼠腦源性NeuroD1慢病毒載體，成功轉染神經干細胞，為進一步研究NeuroD1