1、目的：(1)觀察慢性低O2高CO<,2>對大鼠空間學習記憶的影響及咖啡因干預作用:(2)觀察各組大鼠海馬和皮質神經元在電鏡下的超微結構的改變;(3)檢測各組大鼠海馬和皮質CREBrrIRNA,初步探時咖啡因對慢性低O2高CO<,2>大鼠模型空間學習記憶功能干預作用的可能機制. 方法：將清潔級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠64只,體重180-220g隨機分為四組:正常對照組(NC組,n=16),低O2高CO<,2>4

2、周+飲用水組(HH組,n=16),低O2高CO<,2>4周+咖啡因0.1mg/ml溶液組(HCl組,n=16),低O2高CO<,2>4周+咖啡因0.3 mg/ml溶液組(HC2組,n=16),將后二組大鼠置于常壓低O<,2>高CO<,2>艙內,通過調節(jié)N<,2>來降低艙內O<,2>濃度使其維持在9-11﹪,C02濃度為5.5-6.5﹪,每天8小時,每周6天.對照組大鼠除吸入空氣外,其它條件與其余二組相同.實驗四周后,從各組隨機取8只大鼠

3、,用戊巴比妥鈉(35 mg/kg體重)腹腔注射麻醉,采用右心導管法檢測肺動脈平均壓(mPAP),頸總動脈插管測頸動脈平均壓(mCAP),分別稱取右心窒(RV)和存心室加室間隔(LV+S)的重量,以RV/(LV+S)重量比作為評價右心室肥大指標.其余大鼠行Morris水迷宮實驗,結束后,即將大鼠斷頭,分離海馬和皮質.采用電鏡方法來觀察大鼠的海馬和皮質神經元超微結構變化:采用RT-PCR方法觀察大鼠海馬和皮質CREBmRNA的表達水平.

4、 結果：(1)HH組、HC1和HC2組大鼠的mPAP、RV/(Lv+S)均高于NC組(P均<0.01),在HH組、HCl及HC2組之間比較無顯著性差異(Jp>0.05);(2)Morris水迷宮實驗結果顯示:與NC組相比,HH組大鼠尋找平臺的平均逃避潛伏期延長(P<0.01)、游泳總距離增加(Jp<001);與HH組大鼠相比,HCl組大鼠尋找平臺的平均逃避潛伏期及游泳總距離無明顯下降(P均>0.05):HC2組大鼠尋找平臺的平均潛伏

5、期減少(P<0.01)及游泳總距離明顯下降(Jp<0.05).(3)RT-PCR檢測結果顯示與NC組比較,HH組海馬(P<0.01)及皮層區(qū)CREBmRNA表達水平降低(P<0.05):與HH組比較,HCl組海馬及皮層區(qū)CREBmRNA表達無顯著性差異(P均>0.05),HC2組海馬CREBmRNA表達的明顯升高(P<0.05),皮層無顯著性差異(P>0.05).(4)透射電鏡發(fā)現(xiàn):HH組大鼠海馬及皮層出現(xiàn)神經元凋亡和變性現(xiàn)象,而HC1

6、海馬及皮層神經元改變較HH組輕,而HC2組海馬及皮層神經元無明顯凋亡表現(xiàn).(5)Pearman相關分析顯示,大鼠海馬區(qū)CREBmRNA的吸光度值與平均逃避潛伏期呈明顯負相關(P<0.01),但是皮層區(qū)無類似相關性. 結論：(1)慢性低O<,2>高CO<,2>肺動脈高壓大鼠存在空間學習障礙,而每天飲用0.3mg/ml的咖啡因溶液能改善大鼠的空間學習障礙:每天飲用0.1mg/ml的咖啡因溶液對大鼠的空間學習并無明顯改善作用.(2)慢