1、目的：通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討組蛋白去乙?；敢种苿?histone deacetylase inhibitor，HDACi)CS055(西達(dá)本胺，Chidamide)對(duì)裸鼠人結(jié)腸癌皮下移植瘤的抑制作用，并探討其作用機(jī)制。
　　方法：體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞株，制成細(xì)胞懸液后接種至裸鼠右側(cè)腋部皮下，第3天接種裸鼠腋部皮下可見結(jié)節(jié)，一周后結(jié)節(jié)明顯增大，第21天時(shí)腫瘤約長至1cm×0.8cm×0.8cm大小時(shí)處死裸鼠，剝離并剪切瘤塊至1m

2、m×1mm×1mm左右，選取大小約1mm3～2 mm3瘤塊，利用18G套管針將瘤塊接種至其他裸鼠右側(cè)腋部皮下，用同樣方法體內(nèi)再傳兩代，當(dāng)傳至第四代時(shí)，選取瘤塊接種72只5-6周齡裸鼠，接種后第10天，63只裸鼠成瘤，成功建立人結(jié)腸癌裸鼠皮下移植瘤模型，選取其中均一性較好的55只裸鼠，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，隨機(jī)分成5組11窩，分別予以CS05510mg/(kg.d)(高劑量組)、5mg/(kg.d)(中劑量組)、2.5mg/(kg.d)(低劑

3、量組)灌胃和5-氟尿嘧啶(5-Fu)25mg/(kg.d)(陽性對(duì)照組)腹腔注射，以及陰性對(duì)照藥物0.1mL/10g體重灌胃干預(yù)(100mL滅菌水中加入0.20g羥甲基纖維素鈉和0.10g吐溫-80制成的混懸液即為陰性對(duì)照藥物，如分別加入0.1g、0.05g和0.025g的CS055即配置成高、中、低三種濃度的CS055溶液，按0.1mL/10g體重用藥即相當(dāng)于上述三種CS055的使用劑量，詳見試劑配置部分)。連續(xù)給藥21天，治療期間，

4、觀察裸鼠一般情況，監(jiān)測體重及皮下移植瘤的生長情況，治療結(jié)束后次日，拉頸椎處死裸鼠，測量各組瘤體積及瘤重，計(jì)算瘤重抑制率及腫瘤體積抑制率，取組織行HE染色，并行透射電鏡檢測腫瘤細(xì)胞凋亡，Western-Blot檢測HDAC1、HDAC2、ac-H3、P21、CDK4、cleaved caspase-3的表達(dá)。
　　結(jié)果：72只裸鼠中，63只裸鼠成瘤，成瘤率87.5％。選取的55只裸鼠在實(shí)驗(yàn)過程中無死亡。CS055可明顯抑制裸鼠人結(jié)腸

5、癌皮下移植瘤的生長。與陰性對(duì)照藥物對(duì)比，高劑量組、中劑量組、低劑量組、5-Fu組瘤重抑制率分別為26.56%(P=0.001)、44.81%(P=0.0001)、17.84%(P=0.037)、61.41%(P=0.0002)；腫瘤體積抑制率分別為：15.48%(P=0.088)、40.47%(P=0.002)、12，37%(P=0.221)、55.74%(P=0.003)。CS055能抑制HDAC1和HDAC2的表達(dá)及活性，提高組蛋白