1、目的：
　　研究SERPINB1在肝細胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表達情況,初步分析SERPINB1異常表達與HCC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,旨在能夠進一步揭示HCC的分子發(fā)病機制,為其治療提供新的靶點。
　　方法：
　　1.為了研究SERPINB1在HCC中組織學(xué)水平的表達,本研究通過western blot技術(shù)檢測8例HCC及癌旁新鮮冰凍組織中SERPINB1的表達情況;采用免疫組化

2、方法檢測67例HCC及癌旁組織石蠟切片中SERPINB1的表達情況,并結(jié)合HCC臨床病理資料分析SERPINB1與HCC患者的年齡、性別、腫瘤分級和轉(zhuǎn)移以及血清AFP等因素之間的關(guān)系,并對其進行隨訪,對隨訪結(jié)果應(yīng)用Kaplan-Meier法分析HCC患者生存率,以及單因素和Cox危險比例模型多因素分析SERPINB1與HCC預(yù)后的關(guān)系。
　　2.為了研究SERPINB1在HCC細胞學(xué)水平的表達,本研究通過采用正常肝細胞LO2及HC

3、C細胞中用western blot技術(shù)檢測SERPINB1的表達情況;對HCC細胞株HuH7及BEL-7404進行SERPINB1的轉(zhuǎn)染小干擾,用劃痕實驗及Transwell侵襲實驗檢測細胞遷移和侵襲能力,用CCK8檢測細胞增殖活性,用western blot技術(shù)檢測活化的MMP-2的表達情況。明確SERPINB1對HCC的遷移和侵襲的影響。
　　結(jié)果：
　　1.免疫組化及western blot分析顯示,SERPINB1在

4、HCC組織中的表達明顯低于對應(yīng)的HCC癌旁組織,SERPINB1的表達強度與 HCC轉(zhuǎn)移(p=0.000)和侵襲(p=0.006)之間的關(guān)系有統(tǒng)計學(xué)意義。Kaplan-Meier分析顯示SERPINB1在HCC中的低表達與患者總生存率的降低顯著相關(guān)(p=0.001)。單因素分析表明SERPINB1與HCC病人的不良預(yù)后有關(guān)(p=0.002)。Cox危險比例模型分析顯示SERPINB1可做為HCC預(yù)后的獨立指標(biāo)(p=0.023)。

5、　　2.應(yīng)用western blot分析顯示在正常肝細胞LO2及HCC細胞株中SERPINB1的表達情況,在HCC細胞中表達水平要低于正常肝細胞LO2中的表達水平。對SERPINB1表達相對高的HuH7和BEL-7404進行了SERPINB1轉(zhuǎn)染小干擾后,發(fā)現(xiàn)SERPINB1能夠抑制HuH7及BEL-7404細胞的遷移和侵襲,但是不影響細胞的增殖活性。在轉(zhuǎn)染了si-SERPINB1的細胞中活化的MMP-2表達水平明顯升高。
　　結(jié)