1、單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶（Tannase, EC3.1.1.20），它可水解沒食子單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵，生成沒食子酸和葡萄糖。單寧酶用途廣泛，主要通過微生物利用富含單寧酸的基質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)生。本論文建立了一種高效可行的生產(chǎn)單寧酶的方法，即黑曲霉 B0201利用五倍子生料固體發(fā)酵產(chǎn)單寧酶，并對該方法的發(fā)酵工藝條件及發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化。論文研究了單寧酶的酶學性質(zhì)及冷凍干燥法制備單寧酶粉劑，還對酶法制備沒食子酸進行了初步研究。
　　論文

2、通過比較常規(guī)滅菌發(fā)酵和生料發(fā)酵對黑曲霉 B0201利用五倍子固體發(fā)酵產(chǎn)單寧酶的影響，發(fā)現(xiàn)生料發(fā)酵具有高效實用的優(yōu)勢。研究了五倍子生料發(fā)酵產(chǎn)單寧酶的條件，結(jié)果表明，最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基為：每5g培養(yǎng)基基質(zhì)含1％(NH4)2SO4，0.1％NaCl，0.1％MgSO4，20％五倍子，80％麩皮；最佳產(chǎn)酶條件為：液固比1.6:1、溫度30℃、初始 pH6.0。在該條件下通過96h的培養(yǎng)，單寧酶的活力可達51.2U/gds，是常規(guī)滅菌發(fā)酵的3.6倍。

3、
　　利用響應曲面法對顯著影響產(chǎn)單寧酶的條件進行優(yōu)化，得到生料發(fā)酵產(chǎn)單寧酶的最佳條件為：五倍子含量17％；液固比為1.5:1；溫度32℃。在此最佳發(fā)酵條件下單寧酶活力達56.2U/gds。
　　對黑曲霉B0201利用五倍子為誘導物生料發(fā)酵產(chǎn)胞外單寧酶的提取及酶學性質(zhì)進行了研究。結(jié)果表明：硫酸銨兩步沉淀提取單寧酶的飽和度為40％和90％；該酶的最適溫度為40℃，最適pH為5.0，低于60℃時的熱穩(wěn)定性高，60℃以上迅速失活。Z

4、n2+，Mg2+，吐溫80，EDTA等對酶活力無明顯影響，F(xiàn)e3+，Cu2+，F(xiàn)e2+, Ba2+，Mn2+，Ca2+，Al3+等對酶有抑制作用。以沒食子酸丙酯(PG)為底物，單寧酶的米氏常數(shù) Km為0.514 mmol/L，Vmax為71.8μmol/L·min。
　　對冷凍干燥法制備單寧酶粉劑的研究表明，酶在冷凍干燥過程中酶活有損失，添加1％的聚乙二醇(PEG)可有效保護酶制劑在冷凍干燥過程不失活，并且具有良好的穩(wěn)定性。