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![MLL2在B細胞淋巴瘤中的表達及調控機制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/1d797462-e2d3-495b-a5df-63dc60a8cc4d/1d797462-e2d3-495b-a5df-63dc60a8cc4d1.gif)
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文檔簡介
1、目的:討論混合譜系白血病2(MLL2)基因在B細胞淋巴瘤中的表達趨勢及其在淋巴瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用。
方法:隨機收集2008年至今年我院所收治并經病理證實的B細胞淋巴瘤患者病理切片33例,其中惰性淋巴瘤——濾泡細胞淋巴瘤(FL)18例、侵襲性淋巴瘤——彌漫大B細胞淋巴瘤(DLBCL)15例;收集反應性增生淋巴結(RHL)4例作為對照。應用MLL2抗體行免疫組織化學染色,觀察MLL2蛋白在三組不同病理切片中表達的強弱趨勢及位置差
2、別,并利用免疫反應積分(IRS)法評價免疫組化結果,從而進一步量化三組間MLL2蛋白的表達狀況。利用Western blot技術檢測MLL2在彌漫大B細胞淋巴瘤細胞株(DOHH-2)中的表達,以人胚腎細胞株(HEK293)中MLL2的表達作為正常組織對照。采用RT-PCR方法檢測MLL2 mRNA在DOHH-2及HEK293細胞株中的表達,比較惡性B細胞淋巴瘤與對照細胞株中MLL2的表達趨勢。運用脂質體轉染技術將MLL2 siRNA轉染
3、DOHH-2細胞株,抑制MLL2 mRNA的表達,RT-PCR方法檢測轉染前后VEGF mRNA、β-caenin mRNA的表達變化。流式細胞術檢測MLL2 siRNA轉染后DOHH-2細胞的調亡、細胞周期變化。對所得資料采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計分析,判別標準:P<0.05有統(tǒng)計學意義。進而探討MLL2對B細胞淋巴瘤生長的影響。
結果:1.免疫組化結果表明,B細胞淋巴瘤的病理切片中,本應在細胞核內表達的MLL2蛋白,
4、在細胞核外表達增多。2.隨著腫瘤惡性度的增加彌漫大B細胞淋巴瘤中檢測到的MLL2蛋白量以及MLL2蛋白核外表達現(xiàn)象明顯多于濾泡淋巴瘤和反應性增生淋巴結,且染色強度逐漸加深。3.所有病理切片中,血管內皮細胞及平滑肌細胞均見染色。4.RT-PCR及western blot方法均可以在DOHH-2細胞株中檢測到MLL2的表達,且MLL2siRNA轉染后可檢測到MLL2 mRNA表達水平顯著下降。5.MLL2 siRNA轉染后,誘導淋巴瘤細胞凋
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