1、目的：腫瘤患者普遍存在免疫力低下的狀況。早在上世紀(jì)七十年代,統(tǒng)計(jì)資料表明在發(fā)生多器官功能衰竭或癌擴(kuò)散之前,近50％的癌癥患者是死于各種感染。此外,通過(guò)疫苗主動(dòng)免疫誘導(dǎo)針對(duì)腫瘤特異抗原的CD8+T細(xì)胞應(yīng)答是現(xiàn)代腫瘤免疫治療的發(fā)展方向之一,然而,往往在正常機(jī)體能激發(fā)有效的CD8+T細(xì)胞應(yīng)答的疫苗,在荷瘤機(jī)體中效果并不理想。CD8+T細(xì)胞是參與抗感染免疫和機(jī)體抗腫瘤免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞,其致敏、增殖、分化均在二級(jí)淋巴器官中進(jìn)行,隨后效應(yīng)性CD8

2、+T細(xì)胞遷移到感染或腫瘤局部。腫瘤局部觀察到的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞或因子在腫瘤局部高度富集或高表達(dá),只能部分解釋抗腫瘤免疫低下的現(xiàn)象,不能解釋腫瘤環(huán)境下抗感染免疫低下的現(xiàn)象。腫瘤環(huán)境是否影響二級(jí)淋巴器官中針對(duì)外來(lái)微生物抗原或針對(duì)自身的腫瘤抗原的CD8+T細(xì)胞的啟動(dòng),目前知之甚少。因此本實(shí)驗(yàn)旨在探討腫瘤情況下,二級(jí)淋巴器官中抗感染特異性CD8+T細(xì)胞免疫應(yīng)答的變化及其可能機(jī)制,為腫瘤患者免疫狀況調(diào)節(jié)提供理論依據(jù)。
　　方法：在建立小鼠荷瘤模

3、型的基礎(chǔ)上,尾靜脈感染表達(dá)OVA抗原的李斯特菌(OVA-ListeriaMonocytogenes,OVA-LM),觀察小鼠生存曲線的變化;在荷瘤感染小鼠模型中,通過(guò)流式Pentamer染色和胞內(nèi)細(xì)胞因子染色技術(shù)檢測(cè)小鼠抗OVA257-264表位特異性CD8+T細(xì)胞抗原呈及遞情況免疫應(yīng)答水平的變化;通過(guò)標(biāo)記羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescindiacetatesuccinimidylester,CFSE)的

4、OT-Ⅰ細(xì)胞過(guò)繼轉(zhuǎn)移小鼠,觀察小鼠體內(nèi)抗原特異性CD8+T細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞技術(shù)分析荷瘤情況下小鼠脾臟Treg細(xì)胞及CD11b+Gr-1+細(xì)胞比例變化。
　　結(jié)果：
　　1.荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明顯縮短。
　　2.荷瘤小鼠脾臟抗OVA257-264表位特異性CD8+T細(xì)胞免疫應(yīng)答顯著下調(diào)。
　　3.抗原特異性CD8+T細(xì)胞增殖速率沒(méi)有顯著變化,但是細(xì)胞總數(shù)明顯下降。
　　4.荷瘤小鼠脾臟