1、血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）位于血管中膜，生理?xiàng)l件下，VSMCs通過(guò)收縮和舒張調(diào)節(jié)血管張力。VSMCs由中膜遷移到內(nèi)膜下間隙并異常增殖是動(dòng)脈粥樣硬化（AS）、高血壓和血管再狹窄（RS）等疾病共同的細(xì)胞病理基礎(chǔ)之一。血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷導(dǎo)致多種炎癥因子和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子的表達(dá)和激活紊亂，誘導(dǎo)VSMCs發(fā)生表型改變，刺激VSMCs從血管中膜向內(nèi)膜下間隙遷移，發(fā)生過(guò)度增生和凋亡抑制，從而導(dǎo)致血管壁結(jié)構(gòu)改變。因此，血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、VSMCs增殖與遷移

2、及其表型改變是目前研究新生內(nèi)膜形成和再狹窄的熱點(diǎn)。
　　 多沙唑嗪[（±）doxazosin]屬長(zhǎng)效α1受體阻斷藥，臨床廣泛用于治療良性前列腺增生（BPH）并發(fā)下尿路癥狀（U5TS）；對(duì)于BPH/LUTS合并高血壓的患者，應(yīng)用（±）doxazosin可獲得雙重效果。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究表明，（+）doxazosin具有抑制主動(dòng)脈VSMCs增殖的作用，該抑制作用具有濃度依賴性和α1受體非依賴性等特點(diǎn)。
　　 本研究中，采用M

3、TT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖周期、凋亡率及凋亡蛋白（Bcl-2和Bax），探討（-）doxazosin、（+）doxazosin和（+）doxazosin對(duì)體外培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈VSMCs的增殖與凋亡的影響并分析其作用機(jī)制。
　　 第一部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對(duì)大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響及與α1受體相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究
　　 觀察（±）doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)大鼠VSMCs增殖的影響。在培

4、養(yǎng)的大鼠主動(dòng)脈VSMCs，采用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，探討（-）doxazosin、（+）doxazosin和（+）doxazosin的抗大鼠主動(dòng)脈VSMCs的增殖作用以及與α1受體的相關(guān)性。
　　 1.(±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)VSMCs增殖的影響。
　　 2.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體的非α1受體依賴性抗VSMCs增殖作用。
　　 3.（±）Doxazosin及光學(xué)異構(gòu)體α1受

5、體依賴性抗VSMCs增殖作用。
　　 第二部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對(duì)大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖周期和凋亡的影響
　　 本研究觀察（±）doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠胸主動(dòng)脈VSMCs增殖周期和細(xì)胞凋亡的影響。應(yīng)用Giemsa染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，采用FCM測(cè)定細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡率和凋亡蛋白（Bcl-2和Bax）。探討（±）doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體抗VSMCs增殖的機(jī)制。
　　 1.（±）D

6、oxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)VSMCs的形態(tài)學(xué)影響。
　　 2.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)VSMCs細(xì)胞增殖周期的影響。
　　 3.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)VSMCs凋亡率的影響。
　　 4.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)VSMCs中Bcl-2蛋白和Bax蛋白表達(dá)的影響。
　　 第三部分多沙唑嗪光學(xué)異構(gòu)體對(duì)多種促增殖因子誘導(dǎo)大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響

7、　　 本研究采用MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖活性，觀察了（±）doxazosin）及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)血小板源生長(zhǎng)因子（FDGF-BB）、血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、凝血酶和高糖誘導(dǎo)的大鼠主動(dòng)脈VSMCs增殖的影響。
　　 1.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)PDGF-BB誘發(fā)VSMCs增殖的影響。
　　 2.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)AngⅡ誘發(fā)VSMCs增殖的影響。
　　 3.（±）Doxazo

8、sin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)凝血酶誘發(fā)VSMCs增殖的影響。
　　 4.（±）Doxazosin及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)高糖誘發(fā)VSMCs增殖的影響。
　　 結(jié)論:
　　 1.（-）Doxazosin、（+）doxazosin和（±）doxazosin均可抑制10％小牛血清DMEM液中大鼠胸主動(dòng)脈VSMCs的增殖反應(yīng)；其中，（-）doxazosin的抑制作用明顯強(qiáng)于（+）doxazosin，提示doxazosin在該培養(yǎng)條件下

9、的抗VSMCs增殖作用具有手性藥理學(xué)差異。
　　 2.除α1受體非依賴性抗VSMCs增殖作用以外，（-）doxazosin、（+）doxazosin和（±）doxazosin也具有α1受體依賴性抗VSMCs增殖作用。
　　 3.（-）Doxazosin和（±）doxazosin抗大鼠胸主動(dòng)脈VSMCs增殖的作用與其抑制G0/G1期細(xì)胞向S期轉(zhuǎn)化以及降低細(xì)胞增殖指數(shù)有關(guān)；（+）doxazosin的對(duì)細(xì)胞周期的抑制作用顯著弱

10、于（-）doxazosin。
　　 4.（-）Doxazosin和（±）doxazosin具有誘導(dǎo)大鼠胸主動(dòng)脈VSMCs凋亡的作用，該作用與其調(diào)控Bcl-2蛋白/Bax蛋白比值有關(guān)；提示（±）doxazosin誘導(dǎo)VSMCs凋亡的物質(zhì)基礎(chǔ)是其光學(xué)異構(gòu)體（-）doxazosin而非（+）doxazosin。
　　 5.（±）Doxazosin）及其光學(xué)異構(gòu)體對(duì)PDGF-BB、AngⅡ、凝血酶和高糖誘發(fā)大鼠主動(dòng)脈VSMCs增