1、目的:肝硬化病人60％-80%可發(fā)生糖耐量異常,而10%~20%可最終發(fā)展為糖尿病(diabetes mellitus,GM)。早在1906年就有人提出肝源性GM的概念.肝源性GM指繼發(fā)于慢性肝病或肝硬化的糖尿病。其相關的糖代謝異常發(fā)生機制尚未完全闡明,目前普遍認為胰島素抵抗可能是其最主要的原因。胰島素抵抗即指肝臟、骨骼肌、脂肪等組織對胰島素作用的敏感性下降,胰島素效應細胞對胰島素的反應減弱,也就是說需要超常量的胰島素才能引起正常反應的

2、一種狀態(tài)。胰島素必須與細胞膜上的胰島素受體結合才能啟動胰島素一系列的信號傳導系統(tǒng),最終調節(jié)肌細胞、脂肪細胞和肝細胞對葡萄糖的攝取,并通過抑制糖異生,增加葡萄糖利用和糖原合成,以降低血糖。在胰島素的信號傳導系統(tǒng)中,葡萄糖轉運蛋白-4(glucose transporter-4,GLUT-4)起著關鍵的作用。GLUT-4是最重要的葡萄糖轉運蛋白,承擔著全身50-80%的葡萄糖轉運量,僅表達于胰島素敏感的肌肉細胞(主要是骨骼肌)和脂肪細胞,平

3、時主要在細胞內,在胰島素的刺激下,GLUT-4迅速轉位到細胞膜表面參與葡萄糖的轉運,在葡萄糖的吸收和利用上起了關鍵限速作用,這一過程發(fā)生障礙則引起胰島素抵抗和高血糖癥。GLUT-4將葡萄糖從細胞外轉運到細胞內后,主要通過1型蛋白磷酸酶(glycogen-bound protein phosphatase1,PP1)將葡萄糖轉化成糖原貯存起來。PP1是胰島素激活糖合成酶途徑中的主要磷酸酶,在調節(jié)糖原合成以及葡萄糖的非氧化代謝途徑中起關鍵作

4、用,它由催化亞單位(37KDa)和調節(jié)亞單位(170 KDa),目前的研究主要集中在對調節(jié)它單位的研究上,而對其催化亞單位的研究很少。本實驗的目的是研究肝硬化病人是否存在胰島素抵抗,以及GLUT4和PP1的蛋白和mRNA含量是否存在異常,以期找到肝硬化病人胰島素抵抗的病因,為臨床上更好的治療和干預肝硬化時的胰島素抵抗提供理論基礎。
　　方法:隨機選取正常組25例和肝硬化組(乙肝肝硬化需脾切)24例。
　?、賰山M均在麻醉前取血

5、6ml,用快速血糖儀測定空腹血糖,然后將血靜置30min后,3000rpm,快速離心10min,取其上層血清于一E.P.管中,置于-80℃冰箱中,并用化學發(fā)光免疫分析法測定空腹胰島素和C肽。
　?、趦山M均進腹時取骨骼肌一小塊,并切成50-100mg數(shù)塊,用液氮速凍后置于-80℃超低溫冰箱中,用western blot測定GLUT4,PPlgl的含量,并用RT-PCR測定它們的表達量。
　　結果:肝硬化組的空腹血糖,胰島素,C