1、目的：研究徐州地區(qū)肝豆狀核變性(Hepatolenticular degeneration，HLD)患者ATP7B基因8、13號外顯子突變情況，尋找本地區(qū)的基因突變熱區(qū)，建立可用于臨床的快速、簡便的基因診斷方法；同時分析HLD患者基因高頻突變位點的基因型與臨床表型的關系。
　　方法：以徐州地區(qū)36例非同源家系的HLD患者為研究對象，收集其臨床資料，采集受檢者外周血-20℃凍存，以40例健康正常人為對照組。分別從HLD患者和對照組外

2、周血中提取DNA，PCR擴增ATP7B基因8和13外顯子；對擴增產()分別進行限制性內切酶MspI及BtgI酶切分析，酶切圖譜分析檢出突變的患者行DNA測序驗證，最后將高頻突變位點的基因型與臨床表型作相關性分析。
　　結果：36例HLD患者中，第8外顯子經限制性內切酶MspI酶切圖譜分析檢出18例Arg778Leu突變，其中2例瓊脂糖電泳僅有296bp一條帶，為Arg778Leu純合突變；16例呈現(xiàn)296bp、237bp、59bp

3、三條帶，為Arg778Leu雜合突變。本組患者外顯子8突變的檢出率為50％(18/36)；第13外顯子經BtgI酶切圖譜分析檢出11例Pro992Leu突變，聚丙烯酰胺凝膠電泳呈現(xiàn)384bp、196bp、188bp三條帶，為Pro992Leu雜合突變，未檢出Pro992Leu純合突變，外顯子13突變的檢出率為30.56％(11/36)。其中有4例Arg778Leu雜合突變同時合并Pro992Leu雜合突變，故36例HLD患者中共有25例

4、檢出突變，突變總檢出率為69.44％(25/36)。40例正常對照組未檢測出突變。以上結果均經DNA測序證實。36例HLD患者中，Arg778Leu突變、Pro992Leu突變與臨床分型、陽性家族史等臨床表型之間均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)?；颊甙l(fā)病年齡與HLD陽性家族史之間進行比較，各組間有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論：1.HLD患者ATP7B基因8、13號外顯子可能是徐州地區(qū)突變熱區(qū)，篩選本地區(qū)可疑HLD患者時優(yōu)先