1、目的：確定夜香樹花（簡(jiǎn)稱：CN花）提取物中的有效部位，探討其在體內(nèi)體外抗腫瘤作用和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用、以及對(duì)脾免疫細(xì)胞的影響。
　　方法：
　　1.先后用95％乙醇和50%乙醇對(duì) CN花進(jìn)行回流提取得浸膏，再按極性遞增原則回流提取得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇五個(gè)不同的部位；
　　2.對(duì)不同部位（包括總提取物）進(jìn)行體外抗腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究：即通過MTT法和集落形成法，觀察其對(duì)人胃癌細(xì)胞 SGC7901、

2、黑色素瘤細(xì)胞B16、人肝癌細(xì)胞 Bele7404、白血病細(xì)胞 L1210和P388、人宮頸癌細(xì)胞 Hela增殖的影響情況，并通過倒臵顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，確定出有效部位；
　　3.對(duì)有效部位進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)，確定出最大耐受量或LD50，為進(jìn)行下一步研究奠定基礎(chǔ)；
　　4.對(duì)有效部位的含藥血清進(jìn)行體外抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究，初步判定其在體內(nèi)是否具有抑制腫瘤的作用，為下一步將腫瘤移植到動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)；
　　

3、5.對(duì)有效部位進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤的研究：即建立 H22實(shí)體瘤和S180腹水瘤模型，觀察其對(duì)H22實(shí)體瘤增殖的影響和對(duì)S180荷瘤小鼠生命延長(zhǎng)率的影響；
　　6.對(duì)有效部位進(jìn)行小鼠脾臟淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的研究，觀察其對(duì)脾免疫細(xì)胞的影響；
　　7.對(duì)有效部位進(jìn)行體內(nèi)體外誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究，觀察其在體外和體內(nèi)對(duì)腫瘤細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響。
　　結(jié)果：
　　1.總提取物、正丁醇部位、95%乙醇部位在體外對(duì)人胃癌細(xì)胞S

4、GC7901、黑色素瘤細(xì)胞B16、人肝癌細(xì)胞Bele7404、白血病細(xì)胞L1210和P388、人宮頸癌細(xì)胞He la的增殖有較好的抑制作用，且有效成分主要集中在正丁醇部位和95%乙醇部位；
　　2.總提取物的LD50>10g/kg，表明其毒性小或潛在危險(xiǎn)?。?br>　　3. CN花總提取物的含藥血清在體外可較好的抑制宮頸癌細(xì)胞 Hela的增殖，表明其可能在體內(nèi)對(duì)腫瘤具有抑制作用，為下一步將腫瘤移植到動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)奠定基

5、礎(chǔ)；
　　4.總提取物、正丁醇部位、95%乙醇部位可抑制小鼠H22實(shí)體瘤的增殖，也可明顯提高S180小鼠的生命延長(zhǎng)率；
　　5.總提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位可促進(jìn) ConA、LPS誘導(dǎo)狀態(tài)下的脾T、B淋巴細(xì)胞的增殖，濃度約為20μg/ml下效果最顯著；
　　6. FCM法檢測(cè)顯示：總提取物在體內(nèi)，可能是通過阻斷H22實(shí)體瘤細(xì)胞和S180腹水瘤細(xì)胞由G0/G1期進(jìn)入S期，而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；在體外，可能是通過阻斷宮頸

6、癌細(xì)胞Hela由S期進(jìn)入G2/M期，而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論：總提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位在體外對(duì)不同組織來源的腫瘤細(xì)胞的增殖具有明顯的抑制作用；CN花總提取物的LD50較大，其毒性較小；CN花總提取物的含藥血清在體外可較好的抑制宮頸癌細(xì)胞Hela的增殖；總提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位在體內(nèi)可抑制荷瘤小鼠的瘤體的生長(zhǎng)，明顯延長(zhǎng)荷瘤小鼠的存活期；對(duì)誘導(dǎo)狀態(tài)下的脾T、B淋巴細(xì)胞的增殖有一定的促進(jìn)作用；CN花總提取物在體