1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過研究Pokemon對(duì)E2F-4在肝癌細(xì)胞HepG2中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用，為腫瘤的基因治療提供新的靶點(diǎn)。
　　方法：構(gòu)建E2F-4表達(dá)質(zhì)粒和不同片段長度的E2F-4啟動(dòng)子，通過脂質(zhì)體介導(dǎo)將Pokemon表達(dá)質(zhì)粒和E2F-4啟動(dòng)子、E2F-4表達(dá)質(zhì)粒和Pokemon啟動(dòng)子轉(zhuǎn)染入肝癌細(xì)胞HepG2中，用雙熒光素酶報(bào)告基因法檢測轉(zhuǎn)染后E2F-4、Pokemon的轉(zhuǎn)錄活性；real time PCR法檢測轉(zhuǎn)染Pokemon表達(dá)質(zhì)

2、粒后E2F-4 mRNA的表達(dá)；染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)Pokemon蛋白與E2F-4啟動(dòng)子作用的關(guān)系。
　　結(jié)果：Pokemon表達(dá)質(zhì)粒對(duì)不同片段長度的E2F-4啟動(dòng)子均有抑制作用，E2F-4表達(dá)質(zhì)粒對(duì)不同片段長度的Pokemon啟動(dòng)子也均有抑制作用。轉(zhuǎn)染Pokemon表達(dá)質(zhì)粒后E2F-4 mRNA表達(dá)受到明顯的抑制。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)顯示：細(xì)胞內(nèi)Pokem-on可通過直接結(jié)合E2F-4啟動(dòng)子來調(diào)控E2F-4的表達(dá)。