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文檔簡介
1、目的：觀察Cdk1蛋白表達及其活性對肝癌細胞凋亡的影響。
方法:克隆Cdk1基因質(zhì)粒和Cdk1siRNA,并將其轉(zhuǎn)染到肝癌HepG2細胞中。另外應(yīng)用roscovintine(Cdks的抑制劑)刺激細胞，然后給予紫外線（UV）照射。用WesternBlot檢測轉(zhuǎn)染的Cdk1蛋白的表達，用核素標記測定其活性；用HO33342(Hoechst33342)的免疫熒光染色細胞核判斷細胞凋亡的情況。分析Cdk1蛋白表達及活性對肝癌細胞凋亡
2、的影響。
結(jié)果：Cdk1可以在HepG2良好地表達；Cdk1siRNA可以有效地沉默Cdk1的表達；Roscovintine可抑制Cdk1的活性；細胞凋亡率在Roscovintine刺激細胞時的最高vsCdk1轉(zhuǎn)染細胞組和Cdk1siRNA轉(zhuǎn)染細胞組（P<0.01），在Cdk1轉(zhuǎn)染細胞高于Cdk1siRNA轉(zhuǎn)染細胞組（P<0.01）和EV轉(zhuǎn)染細胞組（P<0.05），在Cdk1siRNA轉(zhuǎn)染細胞最低。結(jié)論：過度表達Cdk1可以增
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