1、腦卒中是目前全世界的頭號(hào)頑疾，它是世界范圍內(nèi)致死致殘和導(dǎo)致癡呆的最為重要的因素。世界范圍內(nèi)，腦卒中的平均發(fā)病率約為200/10萬(wàn)，在我國(guó)國(guó)內(nèi)，腦卒中的發(fā)病率根據(jù)地區(qū)的不同而有異，約是136～486/10萬(wàn)。目前腦卒中已經(jīng)成為中國(guó)人第二位的死亡原因，和第一位的致殘?jiān)颉?br>　　當(dāng)前，對(duì)于缺血性腦卒中的治療原則是及時(shí)地恢復(fù)腦卒中區(qū)域及周?chē)X組織的灌流，保護(hù)仍然存活的但是處于抑制狀態(tài)的腦組織，預(yù)防腦部繼發(fā)性的損傷，這是當(dāng)前最為積極有效的治

2、療方法。組織型凝血酶原激活物(tPA)是目前唯一的一個(gè)經(jīng)過(guò)FDA許可的治療缺血性卒中的藥物。目前因?yàn)閠PA只有狹窄的3個(gè)小時(shí)的治療時(shí)間窗，因此目前該藥的臨床使用率只有約3％。如果溶栓治療超過(guò)了3個(gè)小時(shí)的時(shí)間窗，那么使用tPA治療就會(huì)出現(xiàn)癥狀性顱內(nèi)出血和腦水腫等致命的并發(fā)癥。當(dāng)前對(duì)于溶栓后的腦保護(hù)治療一線(xiàn)用藥仍然是糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物，但是其副作用大大限制了其臨床的應(yīng)用，如增加感染風(fēng)險(xiǎn)，增加消化道潰瘍的發(fā)生。
　　黃芪具有利水消腫、補(bǔ)氣

3、升陽(yáng)、益衛(wèi)固表、托毒生肌的功效，且擅益氣理虛，扶正固本?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)也表明，黃芪具有降低氧化應(yīng)激，抗水腫，抑制凋亡的功效。
　　而現(xiàn)代先進(jìn)的藥學(xué)技術(shù)已從黃芪中分離出了眾多單體，其中黃芪皂甙4(又名黃芪甲苷)目前作為衡量黃芪含量的一個(gè)重要的單體指標(biāo)。已有專(zhuān)家證實(shí)黃芪甲苷能夠降低缺血再灌注后腦內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)，降低腦梗死體積等作用。黃芪甲苷還能夠降低缺血再灌注損傷后大鼠顱內(nèi)一氧化氮合酶、乳酸脫氫酶的活性，從而降低對(duì)腦組織有代謝損傷中產(chǎn)生的乳

4、酸和一氧化氮含量；它能夠下調(diào)一氧化氮合酶mRNA的表達(dá)，同時(shí)上調(diào)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)和肌球蛋白受體激酶(TrkA) mRNA的表達(dá)。這兩種因子能夠調(diào)控神經(jīng)元的生長(zhǎng)，提高神經(jīng)元在病理生理環(huán)境下的生存率。
　　在本實(shí)驗(yàn)中，我們觀(guān)察到黃芪甲苷對(duì)于腦缺血再灌注損傷后對(duì)于血腦屏障具有保護(hù)作用，能夠抑制再灌注后炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)。為溶栓后新的腦保護(hù)藥物的開(kāi)發(fā)提供了寶貴的研究基礎(chǔ)。
　　第一部分，黃芪甲苷對(duì)腦缺血再灌注損傷后血腦屏障的保護(hù)作用

5、
　　目的：觀(guān)察黃芪甲苷對(duì)大鼠缺血再灌注后血腦屏障通透性的保護(hù)效應(yīng)，并對(duì)血腦屏障緊密連接的關(guān)鍵蛋白進(jìn)行測(cè)定，以確定其機(jī)制。
　　方法：選用48只8周的SD大鼠（250~300g）隨機(jī)分配為4組。對(duì)模型組和黃芪甲苷治療組的大鼠進(jìn)行大腦中動(dòng)脈栓塞及再灌注手術(shù)，假手術(shù)組大鼠只進(jìn)行手術(shù)，不進(jìn)行栓塞。在各組動(dòng)物再灌注后24小時(shí)，對(duì)大鼠進(jìn)行麻醉，心臟灌注，然后分別進(jìn)行腦部伊文氏藍(lán)濃度測(cè)定，對(duì)血腦屏障進(jìn)行投射電鏡觀(guān)察，對(duì)血腦屏障緊密連接蛋

6、白 occludin和ZO-1進(jìn)行免疫組化染色，并進(jìn)行觀(guān)察計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果：兩個(gè)黃芪甲苷治療組（10，20mg/kg）能夠顯著抑制缺血再灌注后伊文氏藍(lán)向血管外部的滲透量（P<0.05）；在超微結(jié)構(gòu)中，黃芪甲苷治療能夠維持腦部微血管的整體結(jié)構(gòu)，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞，維護(hù)血腦屏障的緊密連接結(jié)構(gòu)和功能完整。此外，黃芪甲苷能夠顯著抑制缺血再灌注所引起的緊密連接相關(guān)蛋白o(hù)ccludin和ZO-1表達(dá)的下調(diào)（P<0.05）。
　　結(jié)論：黃芪甲苷

7、能夠?qū)δX部缺血再灌注后血腦屏障發(fā)揮顯著的保護(hù)作用，起保護(hù)機(jī)制與其能夠維持血腦屏障上緊密連接蛋白的表達(dá)密切相關(guān)。
　　第二部分，黃芪甲苷對(duì)腦缺血再灌注損傷后中性粒細(xì)胞粘附相關(guān)炎癥因子的抑制作用
　　目的：觀(guān)察黃芪甲苷對(duì)大鼠缺血再灌注后腦實(shí)質(zhì)和運(yùn)動(dòng)功能的保護(hù)效應(yīng)，并對(duì)炎癥反應(yīng)的相關(guān)蛋白進(jìn)行測(cè)定，以確定其保護(hù)的機(jī)制。
　　方法：選用96只8周的SD大鼠（250~300g）隨機(jī)分配為4組。對(duì)模型組和黃芪甲苷治療組的大鼠進(jìn)行大腦

8、中動(dòng)脈栓塞及再灌注手術(shù)，假手術(shù)組大鼠只進(jìn)行手術(shù)，不進(jìn)行栓塞。在各組動(dòng)物再灌注后24小時(shí)，首先進(jìn)行動(dòng)物行為學(xué)評(píng)分。然后對(duì)大鼠進(jìn)行腦部 TTC染色，測(cè)定腦部梗死灶的體積。對(duì)大鼠進(jìn)行心臟灌注，使用免疫組化法和免疫印跡法測(cè)定梗死側(cè)腦部細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1），核轉(zhuǎn)錄因子κb（NF-κb）蛋白的表達(dá)。抽取大鼠的靜脈血，對(duì)血漿中中性粒細(xì)胞上 CD11b/CD18進(jìn)行流式細(xì)胞測(cè)定；提取大鼠血漿和梗死側(cè)腦組織蛋白，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定炎癥

9、因子 TNF-α和IL-1β的濃度，對(duì)腦組織中髓過(guò)氧化物酶（MPO）濃度進(jìn)行測(cè)定。
　　結(jié)果：從大體研究中，黃芪甲苷能夠顯著提高再灌注24小時(shí)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)行為評(píng)分，降低腦梗死灶體積；從分子機(jī)制上，黃芪甲苷能夠顯著降低腦組織中 MPO，TNF-α和IL-1β的濃度；能夠顯著降低血漿中 CD11b/CD18陽(yáng)性白細(xì)胞的百分率，降低 TNF-α和IL-1β因子在血漿中的濃度；此外，黃芪甲苷還能夠抑制 ICAM-1和NF-κb在缺血再灌注后腦

10、組織中表達(dá)的上調(diào)。
　　結(jié)論：黃芪甲苷能夠顯著的發(fā)揮其腦保護(hù)效應(yīng)，維持缺血再灌注后動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能，降低梗死灶的體積，這種保護(hù)的效應(yīng)與其抑制中心粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附及遷移浸潤(rùn)有關(guān)。而這種抑制作用又是通過(guò)對(duì)于中心粒細(xì)胞粘附相關(guān)的關(guān)鍵分子事件的影響來(lái)實(shí)現(xiàn)的。這包括它抑制了缺血再灌注后中心粒細(xì)胞上CD11b/CD18表達(dá)的上調(diào)以及內(nèi)皮細(xì)胞上ICAM-1的上調(diào)。而這個(gè)過(guò)程中又涉及到黃芪甲苷對(duì)前炎癥因子（TNF-α，IL-1β）和炎癥調(diào)控分