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![鮑曼不動桿菌膿毒癥大鼠中性粒細胞的蛋白質(zhì)組學研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/fff29e5a-675a-4999-9476-1076cf6f8a73/fff29e5a-675a-4999-9476-1076cf6f8a731.gif)
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文檔簡介
1、目的:通過分離并鑒定鮑曼不動桿菌膿毒癥大鼠中性粒細胞的差異表達蛋白質(zhì),以發(fā)現(xiàn)可能在鮑曼不動桿菌膿毒癥中起關(guān)鍵作用的蛋白和可用于早期診斷的鮑曼不動桿菌膿毒癥標志物。
方法:將24只成年雄性Wistar大鼠分為正常對照組、鮑曼不動桿菌膿毒癥6小時組和鮑曼不動桿菌膿毒癥12小時組,正常對照組腹腔注射生理鹽水,鮑曼不動桿菌膿毒癥組腹腔注射鮑曼不動桿菌(ATCC19606),并于6小時和12小時后取外周血分離中性粒細胞,提取中性粒細胞的
2、總蛋白后利用雙向凝膠電泳分離蛋白并進行銀染,使用ImageMaster軟件進行分析比較,選取在鮑曼不動桿菌膿毒癥中明顯差異表達的蛋白點行質(zhì)譜分析,并選取蛋白加以免疫印跡驗證。
結(jié)果:
1.獲得了分辨率和重復性均很好的雙向凝膠電泳蛋白圖譜,每組膠的蛋白表達點為2900個左右,平均匹配率分別為95%、90%、91%。
2.對篩選出的在鮑曼不動桿菌膿毒癥中明顯差異表達的50個蛋白點,共有41個蛋白點被成功鑒定,分
3、別屬于抗氧化蛋白、信號傳導蛋白、細胞骨架及調(diào)控蛋白、能量代謝蛋白和蛋白酶類蛋白,其中在鮑曼不動桿菌膿毒癥中高表達的24個,低表達的17個。
3.在41個蛋白中選取蛋白進行免疫印跡驗證,驗證結(jié)果基本與雙向凝膠電泳及質(zhì)譜鑒定結(jié)果一致。
結(jié)論:
1.鮑曼不動桿菌膿毒癥大鼠中性粒細胞總蛋白和正常大鼠中性粒細胞總蛋白相比差異顯著,且膿毒癥6小時組和12小時組的部分蛋白也有顯著差異。
2.本實驗成功鑒定出41
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