1、以蛋白降解增加為特征的骨骼肌蛋白高分解反應(yīng)為膿毒癥最明顯的代謝改變。為了明確膿毒癥骨骼肌萎縮過程中肌肉蛋白的變化，本研究采用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法比較手術(shù)對照組與盲腸結(jié)扎穿孔(cecal ligation puncture，CLP)組大鼠術(shù)后1、3、5、7d伸趾長肌與比目魚肌蛋白圖譜的變化。通過稱量肌肉重量，發(fā)現(xiàn)伸趾長肌于CLP術(shù)后1d明顯輕于手術(shù)對照組(P＜0.05)，而比目魚肌重量于第3d才明顯降低(P＜0.05)。采用雙向電泳方法于伸趾

2、長肌中檢測到16個(gè)差異蛋白，經(jīng)質(zhì)譜方法鑒定出12個(gè)蛋白；同時(shí)于比目魚肌中檢測到17個(gè)差異蛋白，鑒定出13個(gè)。這些差異蛋白按功能分為收縮蛋白，細(xì)胞骨架蛋白，代謝相關(guān)酶，氧化磷酸化蛋白，氧化還原蛋白，應(yīng)激反應(yīng)蛋白以及熱休克蛋白。采用Western blot方法驗(yàn)證了膿毒癥后VDAC2(voltage-dependent anion channel2，VDAC2)，αB-crystailin(Cry AB)及cofilin2的表達(dá)規(guī)律。結(jié)果顯

3、示，CLP術(shù)后兩種肌肉VDAC2表達(dá)降低，cofilin2表達(dá)升高，另外觀察到Cry AB在兩種肌肉中呈現(xiàn)相反的變化，于伸趾長肌中術(shù)后第1d起表達(dá)開始升高，而于比目魚肌中術(shù)后第1d反而降低。我們進(jìn)一步建立了地塞米松(dexamethasone，Dexa)促進(jìn)L6肌管蛋白降解，熱休克或胰島素樣生長因子(insulin-like growth factorⅠ，IGF-Ⅰ)抑制L6肌管蛋白降解的細(xì)胞培養(yǎng)模型，用以觀察候選蛋白的變化規(guī)律。發(fā)現(xiàn)D

4、exa能夠降低肌管中VDAC2的表達(dá)，但對Cry AB及cofilin2的表達(dá)起到增強(qiáng)的作用。熱休克及IGF-Ⅰ均能促進(jìn)三種候選蛋白的表達(dá)，并能有效干預(yù)Dexa對VDAC2表達(dá)的抑制作用。 因此，本研究從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果中得到如下結(jié)論：1、在膿毒癥的打擊下，骨骼肌中氧化還原平衡紊亂為凋亡的誘發(fā)因素；2、膿毒癥骨骼肌蛋白降解可能與VDAC2參與的線粒體凋亡途徑活化有關(guān)；3、CryAB及cofilin2在膿毒癥或Dexa