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文檔簡介
1、目的:
通過體外培養(yǎng)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞,觀察高糖對腎小球血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表達(dá)的影響及前列地爾干預(yù)后的變化情況。
方法:
(1)體外培養(yǎng)小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞,采用Westernblot,細(xì)胞免疫熒光法觀察正常糖對照組(D-glucose5.6mmol/l,NG)、高糖刺激組(D-glucose30mmol/l,HG)、高滲對照組(
2、Mannitol25mmol/l+D-glucose5.6mmol/l,DM),不同時間點刺激小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞后,VEGF蛋白表達(dá)的情況;(2)對VEGF蛋白表達(dá)升高的時間點給予藥物前列地爾干預(yù)后采用westernblot和免疫熒光法觀察其表達(dá)的變化。
結(jié)果:
(1)高糖刺激組與正常糖對照組比較,VEGF蛋白表達(dá)在48h、96h明顯升高(P<0.05),在0h、24h、72h無明顯差異,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)
3、;細(xì)胞免疫熒光顯示高糖組48h、96h平均熒光強(qiáng)度與正常糖對照組比較增強(qiáng),有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);(2)前列地爾干預(yù)組與高糖對照組比較,VEGF蛋白表達(dá)在48h下調(diào)(P<0.05),在96h無明顯改變(P>0.05),但均高于正常糖對照組。細(xì)胞免疫熒光顯示與高糖組比較,前列地爾干預(yù)組熒光強(qiáng)度在48h減弱(p<0.05),而在96h無明顯變化(p>0.05)。
結(jié)論:
(1)體外培養(yǎng)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞可穩(wěn)定表達(dá)VEG
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