1、皂苷是中藥中含量較大，活性較強的一類化合物，在抗腫瘤、抗菌、治療心血管疾病、調(diào)節(jié)機體代謝及免疫等方面有良好的效果，常作為指標(biāo)性成分來評價中藥的質(zhì)量。但由于皂苷類化合物結(jié)構(gòu)特殊，缺乏紫外特征吸收基團，常存在末端吸收問題，其測定較難進行，這也是中藥質(zhì)量控制的難題之一。
　　近年來，衍生化技術(shù)發(fā)展迅速，已廣泛應(yīng)用于氨基酸類、脂肪酸類、生物堿類、酯類、醇類、醛類、糖類及對映體等藥物的分析，也有人應(yīng)用于中藥中皂苷類成分的分析。因為遠志皂苷是

2、遠志藥材的主要活性成分，但采用現(xiàn)有方法較難測定，所以本課題以遠志為考察對象，以遠志皂苷的鹽酸水解產(chǎn)物遠志皂苷元(senegenin)為基本研究對象，采用現(xiàn)有儀器設(shè)備，初步探索了柱前衍生化HPLC-UV測定遠志皂苷元的方法，該方法也為皂苷類成分的測定提供參考。
　　本課題主要研究內(nèi)容和方法:
　　1.以遠志藥材為研究對象，考察了遠志藥材脫脂，遠志皂苷提取、水解的條件，以及大孔吸附樹脂柱層析、硅膠柱層析、中壓制備柱分離制備遠志皂

3、苷元的最佳條件，并在此基礎(chǔ)上，分離制備了遠志皂苷元，然后采用紫外光譜(UV)、質(zhì)譜(MS)、核磁波譜(1HNMR)等手段鑒定了遠志皂苷元，最后采用HPLC-UV面積歸一化法測定了遠志皂苷元的純度。
　　2.以遠志皂苷元(senegenin)為研究對象，對遠志皂苷元進行衍生反應(yīng)研究。主要考察了衍生試劑、衍生反應(yīng)監(jiān)測方法、衍生反應(yīng)方式、衍生反應(yīng)溶劑、衍生反應(yīng)物料比、衍生反應(yīng)時間等因素，最終確定了遠志皂苷元的最優(yōu)化衍生反應(yīng)條件為:采用磁

4、力攪拌，以二氯甲烷為溶劑，4-二甲氨基吡啶(DMAP)為催化劑，吡啶用量（體積）遠志皂苷元（質(zhì)量）的比例為v吡啶∶m遠志皂苷元=50∶1，苯甲酰氯與遠志皂苷元的反應(yīng)物料比m苯甲酰氯∶m遠志皂苷元=60∶1，冰水浴反應(yīng)時間為1h。此條件下遠志皂苷元完全反應(yīng)。
　　3.以遠志皂苷元為研究對象，在最優(yōu)化衍生反應(yīng)條件的基礎(chǔ)上，合成了遠志皂苷元衍生物，同時考察了硅膠柱層析、凝膠柱層析、半制備高效液相分離制備衍生物的方法，并制備遠志皂苷元衍生

5、物純品，然后采用紫外光譜(UV)、質(zhì)譜(MS)、核磁波譜(1HNMR)等手段鑒定了衍生物，其分子式為C44H53ClO8，并將其命名為2，3-二苯甲酰氧基-遠志皂苷元，最后采用HPLC-UV面積歸一化法測定了遠志皂苷元的純度，其純度符合定量分析的化學(xué)對照品要求，從而為柱前衍生化HPLC-UV測定遠志皂苷元提供對照品。
　　4.在遠志皂苷元衍生反應(yīng)研究的基礎(chǔ)上，初步探索了遠志中遠志皂苷元柱前衍生化HPLC-UV測定方法，測定色譜條件

6、為:色譜柱:Diamonsil(鉆石)C18(200mm×4.6mm，5μm);流動相:甲醇-0.05％磷酸溶液(80∶20);流速:1.0ml·min-1;檢測波長:230nm;柱溫:室溫;進樣量:20μl。結(jié)果:線性方程為Y=24310X+2.116（相關(guān)系數(shù)r=0.9995），線性范圍:0.0165～0.33mg·ml-1，最低檢測濃度是0.12μg·ml-1，最低檢測量為2.3ng。該測定方法準(zhǔn)確、靈敏度較高。
　　本文探