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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討RNA干擾survivin基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞放射敏感性的影響。
方法:構(gòu)建針對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞survivin基因靶序列的shRNA真核表達(dá)載體pshRNA-survivin-387。設(shè)置空白對(duì)照組(不加載體)、陰性對(duì)照組(加入pshRNA-survivin-NC)及siRNA轉(zhuǎn)染組(加入pshRNA-survivin-387),用脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測(cè)各組survi
2、vin基因mRNA表達(dá)水平。分別設(shè)置空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、siRNA轉(zhuǎn)染組、X線照射組、siRNA+X線照射組,收集各組細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,MTT法測(cè)定細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)。
結(jié)果:siRNA轉(zhuǎn)染組survivin基因mRNA表達(dá)水平明顯低于空白對(duì)照組及陰性對(duì)照組,差異有顯著性(F=218.93,q=17.73、18.66,P<0.05)。siRNA轉(zhuǎn)染+X線照射組細(xì)胞凋亡率明顯高于其他各組,差異有顯著性(F=142
3、1.83,q=13.81~57.48,P<0.05); siRNA轉(zhuǎn)染組及X線照射組與空白組、陰性組比較,細(xì)胞凋亡率也明顯提高(q=17.55~39.1,P<0.05)。siRNA轉(zhuǎn)染+X線照射組細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)顯著低于其他各組(F=2870.58,q=15.32~72.51,P<0.05); siRNA轉(zhuǎn)染組及單純X線照射組細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)與空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較也明顯降低(q=11.14~73.9,P<0.05)。
結(jié)論:
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