1、中藥委陵菜為薔薇科（Rosaceae）植物委陵菜（Potentilla chinensis Ser.）的干燥全草，《中國藥典》2000，2005年版收載，其性寒，味苦，具有清熱解毒、涼血止痢的作用，常用于赤痢腹痛、久痢不止、痔瘡出血、癰腫瘡毒等。經(jīng)臨床應(yīng)用調(diào)查，天津薊縣中醫(yī)醫(yī)院和天津中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院應(yīng)用委陵菜治療糖尿病，取得了較好的療效。本課題組前期研究表明委陵菜降血糖作用的主要成分為委陵菜黃酮（trans-tiliroside），其

2、降血糖作用強于鹽酸苯乙雙胍，且毒性較低。該化合物與市售雙胍類、硫脲類、α-糖苷酶抑制劑、噻唑烷二酮類以及GLP-1R激動劑肽類藥物在結(jié)構(gòu)上存在根本差異，則可能存在不同的作用機制，是具有較高開發(fā)價值的活性先導化合物。為進一步的委陵菜藥材質(zhì)量控制以及藥物動力學研究提供切實可行的分析方法，本文進行委陵菜黃酮對照品的制備及含量分析方法學的研究。
　　 首先，利用高速逆流色譜技術(shù)分離制備委陵菜黃酮對照品，結(jié)合HPLC選擇溶劑體系以及調(diào)整各

3、溶劑的比例，將提取制備的委陵菜黃酮粗品用于HSCCC分離純化。結(jié)果表明，二氯甲烷-甲醇-水（體積比為5:4:2）為最佳溶劑體系，以上相為流動相，下相為固定相，轉(zhuǎn)速為800r/min，流速為2.0mL/min，分離得到純度達98％的委陵菜黃酮。
　　 本文第二部分進行委陵菜黃酮在藥材和生物樣品中含量分析方法研究。首先，利用高效液相色譜法建立委陵菜藥材中委陵菜黃酮的含量方法，通過考察不同比例的甲醇-醋酸液、乙腈-醋酸液色譜條件對委陵

4、菜黃酮與干擾物分離效果和峰形對稱性的影響，確定采用甲醇-3‰醋酸（49:51）為流動相。通過測定不同生長期和不同生長部位委陵菜藥材中委陵菜黃酮的含量變化，結(jié)果表明7月份采集的委陵菜及其葉中委陵菜黃酮的含量最高，分別為1.018‰和1.477‰。
　　 其次，建立了高效液相色譜測定大鼠血漿樣品中委陵菜黃酮的含量，流動相乙腈-3‰醋酸液（35:65）對委陵菜黃酮與血漿中內(nèi)源性物質(zhì)的分離效果較好，結(jié)果表明該方法準確、快速、靈敏、專屬性

5、強。在此基礎(chǔ)上進一步開展了委陵菜黃酮血漿蛋白結(jié)合率的研究，分別考察了平衡透析法和超濾法，由于委陵菜黃酮在磷酸鹽緩沖液中溶解度較低，穩(wěn)定性較差，且平衡透析所需時間較長（1～2天），而超濾法在30min之內(nèi)能快速分離游離委陵菜黃酮，因此選用超濾法進行委陵菜黃酮與大鼠血漿蛋白結(jié)合實驗，測得委陵菜黃酮血漿蛋白結(jié)合率平均為87.95％。
　　 最后建立了大鼠組織樣品中委陵菜黃酮的含量測定方法，流動相乙腈-3‰醋酸液（28:72）能實現(xiàn)委陵