1、研究目的: 比較生活在高原地區(qū)不同海拔環(huán)境中居民的血液氧化應(yīng)激狀態(tài)及膳食結(jié)構(gòu)和營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入與其抗氧化能力的關(guān)系，借此從營(yíng)養(yǎng)學(xué)的角度為改善高原居民的營(yíng)養(yǎng)與健康狀況提供參考依據(jù)。 研究對(duì)象和方法:1.研究對(duì)象本課題的全部研究對(duì)象均來(lái)自位于云貴高原的云南省云縣，當(dāng)?shù)鼐用窬幼…h(huán)境的海拔跨度為748～3428m。按海拔高度分層，云縣境內(nèi)共有6個(gè)高海拔鄉(xiāng)鎮(zhèn)(HA，>2200m)和8個(gè)低海拔鄉(xiāng)鎮(zhèn)(LA，<1000m)，通過(guò)采取分層多級(jí)隨

2、機(jī)抽樣的方式，分別從中選取了涌寶鄉(xiāng)等3個(gè)高海拔鄉(xiāng)鎮(zhèn)和愛(ài)華鎮(zhèn)、漫灣鎮(zhèn)等4個(gè)低海拔鄉(xiāng)鎮(zhèn)，然后再根據(jù)每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)中自然村的數(shù)目，按一定比例從中隨機(jī)篩選出自然村作為研究基地。 首先在高海拔鄉(xiāng)鎮(zhèn)中，根據(jù)各個(gè)自然村的人口比例，按照門(mén)牌號(hào)隨機(jī)選出240戶家庭進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，依據(jù)預(yù)先設(shè)定的納入和剔除標(biāo)準(zhǔn)，共篩選出120名合格的居民作為高海拔組的研究對(duì)象。然后根據(jù)匹配的隨機(jī)對(duì)照研究方法，匹配年齡、性別、體質(zhì)指數(shù)、體力活動(dòng)水平、飲酒/吸煙情況、月平均收入

3、和文化程度，從低海拔鄉(xiāng)鎮(zhèn)各自然村隨機(jī)選出的280戶家庭中選取120名符合要求的居民作為低海拔組的研究對(duì)象。 2.研究?jī)?nèi)容及方法2.1問(wèn)卷調(diào)查采用統(tǒng)一的調(diào)查表，由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的調(diào)查員詢問(wèn)研究對(duì)象，并根據(jù)其回答如實(shí)填寫(xiě)問(wèn)卷。個(gè)人基本情況調(diào)查包括對(duì)象的一般情況、疾病史、文化程度、個(gè)人平均月收入等。生活方式調(diào)查包括吸煙、飲酒、體力活動(dòng)水平等。膳食調(diào)查采用半定量食物頻數(shù)問(wèn)卷，由調(diào)查員借助食物圖譜及量具，詢問(wèn)并記錄調(diào)查對(duì)象在過(guò)去一年內(nèi)(自調(diào)查之

4、日起的前十二個(gè)月)是否吃某種食物、食用頻次(分每天、每周、每月或每年)和平均每次食用量。 2.2人體測(cè)量所有研究對(duì)象均接受人體測(cè)量，包括身高、體重和血壓，并根據(jù)公式BMI=體重/身高2(kg/㎡)計(jì)算出體質(zhì)指數(shù)。 2.3指標(biāo)檢測(cè)2.3.1血樣收集和處理依據(jù)自愿原則，清晨空腹時(shí)抽取研究對(duì)象3ml肘部靜脈血，其中1ml置于EDTA—K2采血管檢測(cè)血常規(guī)，另外2ml置于肝素鈉采血管中在4℃、3000rpm條件下離心10min，

5、分離血漿和紅細(xì)胞，分裝后置于—40℃冰箱保存待測(cè)。 2.3.2制備紅細(xì)胞膜采用經(jīng)典方法制備紅細(xì)胞膜，并依據(jù)Lowry法測(cè)定紅細(xì)胞膜的蛋白含量。 2.3.3測(cè)定血常規(guī)測(cè)定紅細(xì)胞數(shù)目(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞比積(Hct)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)等六項(xiàng)血常規(guī)。 2.3.4測(cè)定血液氧化應(yīng)激指標(biāo)用比色法分別測(cè)定血漿SOD活性、MDA含量及

6、紅細(xì)胞膜GPx、ATPase活性、MDA含量，并計(jì)算SOD/MDA、GPx/MDA值；用高效液相色譜法測(cè)定血漿維生素A、E含量，各指標(biāo)檢測(cè)均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行相應(yīng)操作。 研究結(jié)果: 1.研究對(duì)象的一般情況進(jìn)入本研究的志愿者共有240名，高、低海拔組各120人。高海拔組中男性65人(BMI為22.5±2.9kg/m2)，女性55人(BMI為21.2±2.4kg/m2)，平均年齡36.9±8.8歲，39.3％具有初/高

7、中文化水平，吸煙率為32.8％，飲酒率為29.4％，38.6％的個(gè)人平均月收入為800～2000元，中等體力活動(dòng)強(qiáng)度的比例為42.2％；低海拔組中男性64人(BMI為22.9±2.7kg/㎡)，女性56人(BMI為21.1±2.4kg/㎡)，平均年齡35.8±8.9歲，43.0％具有初/高中文化水平，吸煙率為25.6％，飲酒率為24.3％，35.5％的個(gè)人平均月收入為800～2000元，中等體力活動(dòng)強(qiáng)度的比例為43.4％。經(jīng)比較，兩組研

8、究對(duì)象在性別、年齡、BMI、文化程度、吸煙/飲酒率、個(gè)人平均月收入和體力活動(dòng)強(qiáng)度等方面的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.膳食及營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入情況2.1日均食物攝入量高海拔組人均每日谷薯類、大豆堅(jiān)果類攝入量分別為640±253g/d和23.4±11.8g/d。動(dòng)物性食物的攝入情況是：畜禽類116±52.8g/d、魚(yú)蝦水產(chǎn)品12.2±5.0g/d，蛋類和奶類分別為18.9±6.7g/d、24.6±10.4g/d。每日攝入蔬菜3

9、10±70.0g/d、水果108±43.5g/d和食用油30.6±8.1g/d。與低海拔組相比，高海拔組研究對(duì)象每日水果和蛋類的攝入量顯著低于低海拔組(P=0.001，0.031)，其他食物種類在兩組間的差異均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與《中國(guó)居民膳食寶塔2007》中的推薦攝入量相比，兩組研究對(duì)象日均大豆堅(jiān)果類、水果、奶類、蛋類和魚(yú)蝦等五類食物的攝入量均未達(dá)到推薦水平。 2.2日均能量及營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入量高、低海拔兩組間的日均能

10、量及營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入量均未發(fā)現(xiàn)顯著性差異(P>0.05)。通過(guò)計(jì)算營(yíng)養(yǎng)素充足比(NAR)，發(fā)現(xiàn)兩組研究對(duì)象僅有蛋白質(zhì)、煙酸、磷、鈉、鐵和錳等6種營(yíng)養(yǎng)素的日均攝入量達(dá)到了推薦值，且其對(duì)應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)素平均充足比(MAR)分別為75.4％、71.7％，組間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.2.1能量的食物種類來(lái)源高、低海拔兩組研究對(duì)象每日的能量均主要來(lái)源于谷類(供能比分別為46.3±9.7％、44.2±7.1％)，畜禽類和奶類次之，然后

11、依次為食用油、其他類及豆類。各類食物供能比在兩組間的差異均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.2.2能量的營(yíng)養(yǎng)素來(lái)源高、低海拔兩組研究對(duì)象每日的能量均主要由碳水化合物提供(供能比分別為46.9±7.9％、48.3±6.2％)，脂肪和蛋白質(zhì)的供能比次之，三大產(chǎn)熱營(yíng)養(yǎng)素的供能比在兩組間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.3蛋白質(zhì)的食物來(lái)源高、低海拔兩組研究對(duì)象每日的蛋白質(zhì)均主要由動(dòng)物性食物提供(分別為59.4±12

12、.5％、61.1±13.1％)，其次是谷類(分別為25.9±9.4％、23.9±8.5％)，然后是其他類及豆類。蛋白質(zhì)的食物來(lái)源百分比在兩組間的差異均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.4脂肪的食物來(lái)源高、低海拔兩組研究對(duì)象每日的脂肪攝入均主要來(lái)源于動(dòng)物性食物(分別為60.9±15.9％、58.8±13.4％)，植物性食物次之(分別為39.1±9.6％、41.2±10.9％)。脂肪的食物來(lái)源百分比在兩組間的差異均沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

13、(P>0.05)。 2.5膳食平衡指數(shù)高、低海拔兩組研究對(duì)象的膳食平衡指數(shù)(DBI)在兩組間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。根據(jù)DBI模式的定義，兩組研究對(duì)象的膳食既存在攝入不足，也有一定程度的攝入過(guò)量。 3.血常規(guī) 高、低海拔兩組研究對(duì)象的六項(xiàng)血常規(guī)都處于人體正常參考值范圍內(nèi)，且在兩組間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4.血液氧化應(yīng)激水平4.1血漿氧化應(yīng)激指標(biāo)高海拔組研究對(duì)象血漿MDA的濃

14、度為9.83±2.06nmol/ml，顯著高于低海拔居民(P=0.004)；而SOD/MDA比值則是高海拔組顯著低于低海拔組(P=0.005)。 4.2血漿氧化應(yīng)激指標(biāo)及其與膳食種類、營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入量的相關(guān)分析控制年齡、性別、海拔、BMI及PAL等因素，經(jīng)過(guò)偏相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)其中MDA含量與維生素E濃度呈負(fù)相關(guān)(r=—0.332，P=0.036)，血漿維生素A濃度與維生素E濃度呈正相關(guān)(r=0.475，P=0.002)，SOD活性與奶

15、類攝入量呈正相關(guān)(r=0.426，P=0.006)，MDA含量與水果及蛋類的攝入量呈負(fù)相關(guān)(r=—0.396、—0.406，P=0.023、0.009)，而SOD/MDA比值與蛋類攝入量呈正相關(guān)(r=0.473，P=0.037)。 4.3紅細(xì)胞膜氧化應(yīng)激指標(biāo)高海拔組紅細(xì)胞膜ATPase活性顯著低于低海拔組(P=0.013)，而MDA含量則顯著高于低海拔組(P=0.001)，同時(shí)GPx/MDA比值顯著低于低海拔組(P=0.023)

16、。 4.4紅細(xì)胞膜氧化應(yīng)激指標(biāo)及其與膳食種類、營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入量的相關(guān)分析控制年齡、性別、海拔、BMI及PAL等因素，經(jīng)過(guò)偏相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)GPx/MDA與大豆類的攝入量呈正相關(guān)(r=0.361，P=0.022)，MDA含量與食用油及脂肪攝入量呈正相關(guān)(r=0.351，0.319，P=0.026，0.045)，ATPase活性與碳水化合物和Fe的攝入量呈正相關(guān)(r=0.333，0.397，P=0.036，0.011)。 4.5血

17、漿與紅細(xì)胞膜氧化應(yīng)激指標(biāo)的相關(guān)分析控制年齡、性別、海拔、BMI及PAL等因素，經(jīng)過(guò)偏相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)所有指標(biāo)間偏相關(guān)系數(shù)對(duì)應(yīng)的P值均大于0.05。 結(jié)論: 1.高海拔組居民的血液氧化應(yīng)激水平顯著高于低海拔組居民，同時(shí)抗氧化能力顯著低于低海拔組居民，提示其機(jī)體受到氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)增大。 2.血漿MDA含量與水果及蛋類的攝入量呈負(fù)相關(guān)，SOD活性與奶類的攝入量呈正相關(guān)，SOD/MDA比值與蛋類的攝入量呈正相關(guān)，提示增加水